| 猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白糖基化位点缺失突变株的构建 |
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| 引用本文： | 张辉,王光利,徐大勇,李峰,徐争辉.猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白糖基化位点缺失突变株的构建[J].中国兽医科学,2012(5):511-516. |
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| 作者姓名： | 张辉 王光利 徐大勇 李峰 徐争辉 |
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| 作者单位： | 淮北师范大学生命科学学院 |
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| 基金项目： | 安徽省自然科学研究基金项目(KJ2010B192);安徽省优秀青年人才基金项目(2010SQRL082) |
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| 摘 要： | 以含有猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)VR-2332株全长感染性cDNA克隆的质粒pVR2332为模板,通过融合PCR方法扩增GP5蛋白第34、51位天冬酰胺糖基化位点缺失的突变序列,替换pVR2332质粒中编码GP5蛋白的DNA片段,分别获得重组质粒pVR-N34A、pVR-N51A。在体外转录后转染BHK-21细胞,转染后第48小时收集细胞接种Marc-145细胞,进行突变病毒的拯救。然后通过RT-PCR扩增拯救病毒GP5蛋白的编码序列,序列分析显示构建正确。间接免疫荧光试验证明拯救病毒能够正常表达GP5蛋白。同时,中和试验结果初步表明GP5糖基化位点缺失影响PRRSV与中和抗体的反应。猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白不同糖基化位点缺失突变株的获得将为进一步揭示GP5蛋白糖基化与诱发机体免疫反应之间的关系奠定基础。
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| 关 键 词： | 猪繁殖与呼吸综合征病毒 感染性克隆 GP5蛋白 糖基化 |
Construction of porcine reproductive and respiratory syndrome virus with GP5 protein mutants at putative glycosylation sites |
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| ZHANG Hui,WANG Guang-li,XU Da-yong,LI Feng,XU Zheng-hui.Construction of porcine reproductive and respiratory syndrome virus with GP5 protein mutants at putative glycosylation sites[J].Veterinary Science in China,2012(5):511-516. |
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| Authors: | ZHANG Hui WANG Guang-li XU Da-yong LI Feng XU Zheng-hui |
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| Institution: | (College of Life Sciences,Huaibei Normal University,Huaibei 235000,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | porcine reproductive and respiratory syndrome virus infectious clone GP5 protein glycosylation |
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