犬瘟热病毒反转录环介导等温扩增诊断方法的建立 |
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引用本文: | 刘彩玉,王吉贵,袁道莉,王爽,朱新产,刘维全.犬瘟热病毒反转录环介导等温扩增诊断方法的建立[J].中国兽医科学,2010,40(4). |
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作者姓名: | 刘彩玉 王吉贵 袁道莉 王爽 朱新产 刘维全 |
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作者单位: | 刘彩玉,LIU Cai-yu(青岛农业大学生命科学学院,山东青岛,266109;中国农业大学生物学院,北京,100193);王吉贵,袁道莉,王爽,刘维全,WANG Ji-gui,YUAN Dao-li,WANG Shuang,LIU Wei-quan(中国农业大学生物学院,北京,100193);朱新产,ZHU Xin-chan(青岛农业大学生命科学学院,山东青岛,266109) |
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摘 要: | 根据GenBank中犬瘟热病毒H基因保守序列设计合成了内(FIP,BIP)、外(F3,B3)2对引物,其中外引物扩增片段的大小为247 bp。通过对反应条件中内、外引物的比例、dNTP浓度、Mg2+浓度、反应温度和时间等条件逐一优化,成功建立了犬瘟热病毒的RT-LAMP检测方法。该方法在60℃下保温50 min即可完成,可检测至10-1TCID50的病毒,与常规RT-PCR检测方法相比灵敏度高100倍。对犬腺病毒、犬细小病毒、狂犬病病毒、犬冠状病毒、犬瘟热病毒同时检测,结果显示,本方法具有高度的特异性。
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关 键 词: | 犬瘟热病毒 反转录环介导等温扩增反应 诊断 |
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