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新生大鼠大脑皮质神经元原代培养方法的建立及其活性鉴定
引用本文:梅莉,路浩,刘宗平,何玉琴.新生大鼠大脑皮质神经元原代培养方法的建立及其活性鉴定[J].中国兽医科学,2007,37(3):264-268.
作者姓名:梅莉  路浩  刘宗平  何玉琴
作者单位:1. 扬州大学,兽医学院,江苏,扬州,225009;甘肃农业大学,动物医学院,甘肃,兰州,730070
2. 扬州大学,兽医学院,江苏,扬州,225009
3. 甘肃农业大学,动物医学院,甘肃,兰州,730070
摘    要:采用倒置相差显微镜、环境扫描电子显微镜对新生24 h内SD大鼠大脑皮质原代培养的神经元进行了形态学观察,建立了大脑皮质神经元原代培养方法。应用2.5μg/mL阿糖胞苷(Ara-C)对培养3 d的神经元进行24 h干预,去除神经胶质细胞、成纤维细胞、神经干细胞等杂质细胞,以提高神经元产率;用Nissl’s染色法进行神经元鉴定;利用微量滴定(MTT)法测定了一个培养周期(约10 d)的神经元活性分布。光学显微镜观察结果表明,培养至第4 h绝大多数神经元已贴壁生长,胞体上可见1~2个细小突起;培养至第3 d、第6 d时,Nissl’s染色结果显示,加Ara-C能显著提高神经元纯度(≥92%);MTT结合形态学观察结果表明,神经元培养至第6 d时活性最强,细胞呈卵圆形、蜘蛛状、锥体状等多种形态,细胞胞体饱满,光晕明显,神经网络形成完整。

关 键 词:大脑皮质神经元  原代培养  Nissl's染色  活性鉴定
文章编号:1673-4696(2007)03-0264-05
修稿时间:2006年11月9日

Primary culture and viability assessment of the cerebral cortical neurons from newborn SD rat
MEI Li,LU Hao,LIU Zong-ping,HE Yu-qin.Primary culture and viability assessment of the cerebral cortical neurons from newborn SD rat[J].Veterinary Science in China,2007,37(3):264-268.
Authors:MEI Li  LU Hao  LIU Zong-ping  HE Yu-qin
Abstract:
Keywords:MTT
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