| 猪繁殖与呼吸综合征病毒重组质粒pEGFP-NSP9的构建与表达 |
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| 引用本文： | 吴锦艳,田宏,陈妍,尚佑军,刘湘涛,吴润.猪繁殖与呼吸综合征病毒重组质粒pEGFP-NSP9的构建与表达[J].中国兽医科学,2012(8):843-847. |
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| 作者姓名： | 吴锦艳 田宏 陈妍 尚佑军 刘湘涛 吴润 |
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| 作者单位： | 甘肃农业大学动物医学院;中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室国家口蹄疫参考实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室 |
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| 基金项目： | 国家现代肉羊产业技术体系项目(nycytx-39) |
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| 摘 要： | 为验证siRNAs对猪繁殖与呼吸综合征病毒复制的抑制效果,构建了猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP9基因与增强型绿色荧光蛋白基因GFP的融合表达质粒,并在Marc145细胞中进行了表达。通过RT-PCR方法扩增猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP9基因,将其克隆入表达载体pEGFP-N1,并进行双酶切、PCR及测序鉴定。将阳性重组质粒转染Marc145细胞,检测绿色荧光蛋白的表达和NSP9基因转录水平。结果显示,经双酶切及PCR鉴定,目的基因的大小与预期相符。荧光显微镜和流式细胞仪均检测到细胞内绿色荧光蛋白的表达,荧光定量PCR检测到细胞内有NSP9基因的转录。本研究成功构建的猪繁殖与呼吸综合征病毒NSP9基因GFP融合表达质粒,为在细胞水平快速筛选有效的siRNAs提供了工具。
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| 关 键 词： | 猪繁殖与呼吸综合征病毒 NSP9基因 绿色荧光蛋白 融合表达 |
Construction and expression of the recombination plasmid pEGFP-NSP9 of porcine reproductive and respiratory syndrome virus |
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| WU Jin-yan,TIAN Hong,CHEN Yan,SHANG You-jun,LIU Xiang-tao,WU Run.Construction and expression of the recombination plasmid pEGFP-NSP9 of porcine reproductive and respiratory syndrome virus[J].Veterinary Science in China,2012(8):843-847. |
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| Authors: | WU Jin-yan TIAN Hong CHEN Yan SHANG You-jun LIU Xiang-tao WU Run |
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| Institution: | 1(1.College of Veterinary Medicine,Gansu Agricultural University,Lanzhou 730070,China;2.State Key Laboratory of Veterinary Etiological Biology/National Foot-and-Mouth Disease Reference Laboratory/Key Laboratory of Animal Virology of the Ministry of Agriculture/Lanzhou Veterinary Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Lanzhou 730046,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | porcine reproductive and respiratory syndrome virus NSP9 gene green fluorescent protein |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
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