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| 惠阳胡须鸡Ⅱ型干扰素基因在毕赤酵母中的表达及其产物活性分析 | |
| 引用本文： | 韩春来,吴志光,史喜菊,张灿,柏亚铎,汪明.惠阳胡须鸡Ⅱ型干扰素基因在毕赤酵母中的表达及其产物活性分析[J].中国兽医科学,2006,36(4):311-314. |
| 作者姓名： | 韩春来 吴志光 史喜菊 张灿 柏亚铎 汪明 |
| 作者单位： | 1. 中国农业大学,动物医学院,北京,100094;北京市兽医卫生监督检验所,北京,100044 2. 中国农业大学,动物医学院,北京,100094 3. 北京市出入境检验检疫局,北京,100026 4. 莱阳农学院,动物科技学院,山东,青岛,266109 |
| 摘 要： | 为了确定惠阳胡须鸡IFN-γ基因(chIFN-γ2)在毕赤酵母中表达的重组蛋白的抗病毒活性和蛋白的二级结构,将pGEM-T-chIFN-γ2重组质粒中的chIFN-γ2基因克隆到表达质粒pPICZαB上,经酶切鉴定、PCR鉴定和测序后的序列同源性分析,证明目的基因没有发生缺失、突变,并且插入方向正确。将重组质粒电转化到毕赤酵母感受态细胞GS115中,阳性转化子经甲醇诱导表达,获得了高效分泌表达。重组IFN-γ的分子质量约为33 ku,表达量达0.604 mg/mL,在鸡胚成纤维细胞(CEF)上抑制VSV的抗病毒活性为3.2×104U/mg。圆二色性分析表明,IFN-γ酵母重组蛋白属于典型的α螺旋蛋白,二级结构含量为:α螺旋55.1%,β折叠8.3%,转角13.9%,无规卷曲22.8%。采用毕赤酵母分泌表达了有活性的鸡IFN-γ,并首次证明鸡IFN-γ重组蛋白属于典型的α型蛋白。 |
| 关 键 词： | 惠阳胡须鸡 Ⅱ型干扰素 毕赤酵母 表达 抗病毒活性 |
| 文章编号： | 1673-4696(2006)04-0311-04 |
| 修稿时间： | 2005年9月5日 |
Expression of Huiyang chicken IFN-γ gene in Pichia pastoris and analysis of antiviral activity of the recombinant protein |
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| HAN Chun-lai,WU Zhi-guang,SHI Xi-ju,ZHANG Can,BAI Ya-duo,WANG Ming.Expression of Huiyang chicken IFN-γ gene in Pichia pastoris and analysis of antiviral activity of the recombinant protein[J].Veterinary Science in China,2006,36(4):311-314. | |
| Authors: | HAN Chun-lai WU Zhi-guang SHI Xi-ju ZHANG Can BAI Ya-duo WANG Ming |
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