| H3N8亚型马流感病毒VLPs的构建及其生物学特性分析 |
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| 引用本文： | 刘春国,王伟,刘飞,刘彦云,王丹,吕让,刘明,相文华.H3N8亚型马流感病毒VLPs的构建及其生物学特性分析[J].中国兽医科学,2014(3). |
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| 作者姓名： | 刘春国 王伟 刘飞 刘彦云 王丹 吕让 刘明 相文华 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室;中国农业科学院上海兽医研究所;黑龙江省人民医院; |
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| 基金项目： | 公益性行业(农业)科研专项(201303046-08) |
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| 摘 要： | 为了构建含H3N8亚型马流感病毒HA蛋白和M1蛋白的病毒样颗粒疫苗,把A/equine/Xinjiang/3/2007(H3N8)的HA基因和M1基因克隆到杆状病毒穿梭载体pFastBac Dual中,将得到的重组穿梭质粒pFBD-XJ3HA-M1转化至DH10Bac感受态细胞,与杆状病毒骨架质粒Bacmid进行重组从而获得重组杆状病毒转座子rBac-XJ3HA-M1,然后将其转染Sf9昆虫细胞,包装重组杆状病毒rBV-XJ3HA-M1。通过PCR鉴定、细胞免疫组织化学试验、Western-blot分析以及血凝试验证明,HA蛋白和M1蛋白在昆虫细胞中能够有效表达,且表达产物具有良好的反应活性,表达的HA蛋白具有血凝活性。电镜观察发现,HA蛋白和M1蛋白能够稳定形成病毒样颗粒。上述研究结果为研制马流感亚单位疫苗提供了技术储备,也为马流感病毒蛋白的功能研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | 马流感病毒 HN亚型 HA基因 M基因 杆状病毒双表达 病毒样颗粒 |
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