| 多杀性巴氏杆菌prfA基因的序列分析与原核表达 |
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| 引用本文： | 李影,郭东春,王淑亚,张爱芹,胡晓亮,王雅静,刘家森,姜骞,曲娟娟,曲连东.多杀性巴氏杆菌prfA基因的序列分析与原核表达[J].中国兽医科学,2014(3). |
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| 作者姓名： | 李影 郭东春 王淑亚 张爱芹 胡晓亮 王雅静 刘家森 姜骞 曲娟娟 曲连东 |
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| 作者单位： | 东北农业大学生命科学学院;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室;东北农业大学动物医学院;黑龙江八一农垦大学动物科技学院; |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(31302109);国家科技支撑计划项目(2013BAK11B01) |
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| 摘 要： | 为探索多杀性巴氏杆菌的致病机理,采用PCR方法分别扩增了家兔源和禽源多杀性巴氏杆菌C51-17、Pm898、Pm8916、Pm901、Pm9616、PmZM、PmQin菌株的prfA基因,并对其进行序列分析。将C51-17株的prfA基因克隆到质粒pET30a中,将重组表达载体pET30a-prfA转化到大肠杆菌BL21(DE3)pLysS感受态细胞中,经IPTG诱导表达,进行SDS-PAGE分析和Western-blot分析。结果显示,这7株菌株与GenBank登录的3株多杀性巴氏杆菌之间prfA基因在核苷酸水平上的同源性为95.6%~100%,在氨基酸水平上的同源性为98.9%~100%。诱导表达的重组蛋白PrfA的分子质量约为45.6ku,与预期的大小一致,以可溶性形式表达。重组蛋白PrfA可与家兔抗多杀性巴氏杆菌阳性血清反应,具有良好的反应原性。
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| 关 键 词： | 多杀性巴氏杆菌 prfA基因 序列分析 原核表达 |
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