| 犬新孢子虫NcAMA1基因重组腺病毒穿梭质粒的构建及其真核表达 |
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| 引用本文： | 郭焕平,贾立军,于龙政,薛书江,高洋,李男礼,张守发.犬新孢子虫NcAMA1基因重组腺病毒穿梭质粒的构建及其真核表达[J].中国兽医科学,2014(3). |
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| 作者姓名： | 郭焕平 贾立军 于龙政 薛书江 高洋 李男礼 张守发 |
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| 作者单位： | 延边大学农学院动物医学系; |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(31160501,31360605);吉林省重点科技攻关项目(20140204078NY);吉林省青年科研基金项目(201201076) |
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| 摘 要： | 为构建犬新孢子虫NcAMA1基因重组腺病毒穿梭质粒,并在真核细胞中表达,以重组质粒pVAX1-NcAMA1为模板,PCR扩增了NcAMA1基因,以此构建了pMD18T-NcAMA1重组克隆质粒;对该重组克隆质粒进行双酶切鉴定后,将其亚克隆至腺病毒穿梭载体pCR259中。应用脂质体介导转染法将经PCR鉴定和酶切鉴定正确的pCR259-NcAMA1重组穿梭质粒转染293细胞,应用IFAT和Western-blot技术检测了AMA1基因在293细胞中的表达情况。结果显示,扩增的NcAMA1基因长度为1 695bp,构建的重组腺病毒穿梭质粒pCR259-NcAMA1能在293细胞中获得瞬时表达,表达蛋白的分子质量约为68ku。
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| 关 键 词： | 犬新孢子虫 NcAMA基因 腺病毒穿梭质粒 表达 |
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