周围神经浸出液对犬脂肪干细胞向神经膜细胞分化的影响

本研究旨在研究周围神经浸出液对犬脂肪源性干细胞(adipose derived stem cells,ADSCs)向神经膜细胞(Schwann cell,SCs)分化的影响。采用Ⅰ型胶原酶消化法体外原代培养犬ADSCs,并应用流式细胞术进行表型分析,同时观察所培养细胞的成脂成骨分化能力。分离犬坐骨神经,无菌剪碎、浸出和过滤制备犬周围神经浸出液。将周围神经浸出液作为诱导剂,作用于犬ADSCs,7d后分别通过倒置显微镜观察细胞形态的变化;免疫荧光试验和Western-blot观察SCs标志蛋白GFAP和S-100的表达情况。结果显示,周围神经浸出液作用于犬ADSCs 7d后,大多数细胞形态由原来的三角形或梭形变为两端伸出2个细长突起的长梭形,非常像成熟SCs的形态;免疫荧光和Western-blot试验显示,周围神经浸出液诱导ADSCs后,细胞出现GFAP和S-100阳性表达。以上结果提示,周围神经浸出液能有效诱导犬ADSCs向SCs分化。