鸡传染性法氏囊病病毒单克隆抗体杂交瘤细胞系建立

(一)材料 1.病毒:传染性法氏囊病病毒F_(16)(IBDVF_(16))引自哈尔滨兽医研究所;新城疫病毒(NDV)由本所提供。 2.小白鼠骨髓瘤细胞系:NS-1和Sp 2/0均引自解放军兽医大学军事兽医研究所。 3.动物:8～12周龄BALB/C小鼠引自卫生部北京生物制品研究所。 (二)抗原制备 把IBDV-F_(16)经30日龄公鸡体内增殖后,收集病变明显的法氏囊制成乳剂,测其病毒滴度为10~7TCID_(50)/0.1ml,-30℃保存备用。使用时常规离心、硫酸铵沉淀、高速离心,同时用密度梯度超速离心制备纯化IBDV抗原。提纯后的抗原经磷钨酸负染,JFM—T电镜观察(放大117000倍),病毒粒子呈六角形,大小为60nm。提纯病毒的蛋白含量为3.25mg/ml。