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猪附红细胞体PCR-ELISA检测方法的建立
引用本文:夏晓辉,丁晓双,张晓轩,海旭南,贾立军,张守发,许应天.猪附红细胞体PCR-ELISA检测方法的建立[J].中国兽医科学,2013(2):164-169.
作者姓名:夏晓辉  丁晓双  张晓轩  海旭南  贾立军  张守发  许应天
作者单位:延边大学农学院动物医学系
基金项目:公益性行业(农业)科研专项(200903036-13)
摘    要:根据猪附红细胞体OxaA膜蛋白基因设计了1对分别标记生物素和地高辛的引物,将PCR扩增产物固定至链霉亲和素包被的酶标板中进行酶联显色检测,并优化PCR扩增及ELISA检测步骤,建立了猪附红细胞体PCR-ELISA。结果显示,该方法较传统的PCR-ELISA节约近2h,最低能检出0.36pg的猪附红细胞体DNA,敏感性比常规PCR高10倍,且与猪链球菌、猪肺炎霉形体、大肠杆菌等无交叉反应。用该方法对64份猪血液中提取的DNA样品进行检测,结果阳性检出率为35.9%,明显高于常规PCR的28.1%。结果表明,建立的猪附红细胞体PCR-ELISA具有敏感、特异、安全和快速的特点。

关 键 词:猪附红细胞体  PCR-ELISA  OxaA基因

Development of PCR-ELISA method for detection of Eperythrozoon suis
XIA Xiao-hui,DING Xiao-shuang,ZHANG Xiao-xuan,HAI Xu-nan,JIA Li-jun, ZHANG Shou-fa,XU Ying-tian.Development of PCR-ELISA method for detection of Eperythrozoon suis[J].Veterinary Science in China,2013(2):164-169.
Authors:XIA Xiao-hui  DING Xiao-shuang  ZHANG Xiao-xuan  HAI Xu-nan  JIA Li-jun  ZHANG Shou-fa  XU Ying-tian
Institution:(Department of Veterinary Medicine,College of Agriculture,Yanbian University,Yanji 133002,China)
Abstract:
Keywords:
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