| 猪凋亡细胞因子Fas、FasL、TNFRl和TNF-αSYBR Green Ⅰ real-time PCR检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 施开创,莫胜兰,许瑞胜,陆文俊,刘棋.猪凋亡细胞因子Fas、FasL、TNFRl和TNF-αSYBR Green Ⅰ real-time PCR检测方法的建立[J].中国兽医科学,2009,39(10). |
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| 作者姓名： | 施开创 莫胜兰 许瑞胜 陆文俊 刘棋 |
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| 作者单位： | 施开创,莫胜兰,陆文俊,刘棋(广西动物疫病预防控制中心,广西,南宁,530001);许瑞胜(广西大学动物科学技术学院,广西,南宁,530005) |
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| 基金项目： | 广西科学基金项目，广西科技创新能力与条件建设基金项目 |
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| 摘 要： | 分别针对猪凋亡细胞因子Fas、FasL、TNFR1、TNF-α基因以及看家基因β-actin的序列设计了1对特异性引物,构建含有各自引物扩增序列的重组质粒作为阳性标准品,建立了检测Fas、FasL、TNFR1、TNF-α及β-actin的SYBR Green Ⅰ real-time PCR方法.该方法线性关系好(r2≥0.995),敏感性高,初始模板的检出下限除TNFR1为1×102 copies/μL外,其他均为1×101 copies/μL;特异性强,扩增产物形成单一的特异性熔解峰;重复性好,组内与组间的变异系数均小于3%.应用所建立的方法对猪生殖与呼吸综合征病毒感染仔猪外周血单个核细胞中Fas、FasL、TNFRl和TNF-α mRNA的表达水平进行了检测.结果表明,建立的real-time PCR检测方法灵敏度高、特异性强、重复性好.
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| 关 键 词： | 猪 凋亡细胞因子 荧光定量PCR SYBR Green Ⅰ |
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