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| Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒RT-PCR检测方法的建立 | |
| 引用本文： | 程安春,汪铭书,信洪一,陈海军,杨苗,郭宇飞,朱德康,贾仁勇,袁桂萍,陈孝跃.Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒RT-PCR检测方法的建立[J].中国兽医科学,2007,37(1):38-42. |
| 作者姓名： | 程安春 汪铭书 信洪一 陈海军 杨苗 郭宇飞 朱德康 贾仁勇 袁桂萍 陈孝跃 |
| 作者单位： | 1. 四川农业大学,动物科技学院,禽病防治研究中心,四川,雅安,625014;动物疫病与人类健康四川省重点实验室,四川,雅安,625014;四川农业大学,实验动物工程技术中心,四川,雅安,625014 2. 四川农业大学,动物科技学院,禽病防治研究中心,四川,雅安,625014;动物疫病与人类健康四川省重点实验室,四川,雅安,625014 3. 四川农业大学,动物科技学院,禽病防治研究中心,四川,雅安,625014 4. 动物疫病与人类健康四川省重点实验室,四川,雅安,625014 5. 四川农业大学,动物科技学院,禽病防治研究中心,四川,雅安,625014;四川农业大学,实验动物工程技术中心,四川,雅安,625014 |
| 基金项目： | 国家科技攻关项目;科技部农业科技成果转化基金;教育部跨世纪优秀人才培养计划;四川省基础研究重大项目;四川省杰出青年学科带头人基金后续项目;四川省重点学科建设项目 |
| 摘 要： | 根据获得的Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒(DHVⅠ)RNA聚合酶基因序列,应用Primer Premier 5.0软件设计了1对引物,建立了检测DHVⅠ的RT-PCR方法。该法能从DHVⅠ中扩增到440 bp的条带,而对正常鸭胚尿囊液、健康鸭肝、鸭瘟病毒、番鸭细小病毒、鹅细小病毒、雏鹅新型病毒性肠炎病毒、禽流感病毒(H5N2亚型)、鸭病毒性肿头出血症病毒、鸭源多杀性巴氏杆菌(5∶A)的扩增结果均为阴性。该法最低可以检测到30 pg的DHVⅠ核酸模板。RT-PCR对DHVⅠ强毒CHV-1株人工感染发病死亡鸭肝的检测结果与病毒分离和Dot-ELISA检测结果的阳性检出率均为100%,对脾、肺、脑病料的检出率显著(P≤0.01)高于病毒分离和Dot-ELISA。RT-PCR、病毒分离和Dot-ELISA对1987~2005年采集且保存于-20℃的经病毒分离已确诊为鸭肝炎的临床送检肝病料的检出率分别为100%(19/19)、36.84%(7/19)和57.98%(11/19),对2000~2005年采集且于-20℃保存的来源于中国18个省份发病鸭群的48份肝病料的检出率分别为100%(48/48)、56.25%(27/48)和75.00%(36/48)。结果表明,建立的RT-PCR方法具有良好的特异性和敏感性,可用于DHVⅠ的分离鉴定、临床病料的检测和分子流行病学调查。 |
| 关 键 词： | Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒 检测 应用 |
| 文章编号： | 1673-4696(2007)01-0038-05 |
| 修稿时间： | 2006年9月21日 |
Development of a RT-PCR assay to detect duck hepatitis virus type Ⅰ |
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| CHENG An-chun,WANG Ming-shu,XIN Hong-yi,CHEN Hai-jun,YANG Miao,GUO Yu-fei,ZHU De-kang,JIA Ren-yong,YUAN Gui-ping,CHEN Xiao-yue.Development of a RT-PCR assay to detect duck hepatitis virus type Ⅰ[J].Veterinary Science in China,2007,37(1):38-42. | |
| Authors: | CHENG An-chun WANG Ming-shu XIN Hong-yi CHEN Hai-jun YANG Miao GUO Yu-fei ZHU De-kang JIA Ren-yong YUAN Gui-ping CHEN Xiao-yue |
| Abstract: | |
| Keywords: | RT-PCR |
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