| 禽多杀性巴氏杆菌C48-1成熟外膜蛋白H基因原核表达最适条件的探索 |
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| 引用本文： | 曹素芳,黄青云,韩先干,邓宪方.禽多杀性巴氏杆菌C48-1成熟外膜蛋白H基因原核表达最适条件的探索[J].中国兽医科学,2005,35(1):45-48. |
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| 作者姓名： | 曹素芳 黄青云 韩先干 邓宪方 |
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| 作者单位： | 华南农业大学,兽医学院,广东,广州,510642 |
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| 基金项目： | 广东省自然科学基金资助项目(3227) |
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| 摘 要： | 应用PCR扩增出禽多杀性巴氏杆菌C48 1成熟外膜蛋白H基因(ompmH),将ompmH片段按正确的阅读框定向插入原核表达载体pGEX 6p 1中谷胱甘肽转移酶(GST)基因的下游,获得了重组表达质粒pGEX ompmH。然后将重组质粒转化大肠埃希氏菌BL21(DE3),当转化菌的D600nm值达到0.6～0.8时,对异丙基硫代 β D 半乳糖苷(IPTG)的诱导浓度、诱导时间和诱导温度等条件进行了试验,根据聚丙烯酰胺凝胶电泳判定融合蛋白GST ompmH表达的最适条件。结果,当细菌的D600nm值为0.6～0.8时,IPTG最佳诱导浓度为0.8mmol L,最佳诱导时间为4h,最适诱导温度为25℃。并用免疫印迹法对表达产物进行检测,结果显示表达的融合蛋白GST ompmH能与C48 1外膜蛋白免疫血清发生特异性反应,证明pGEX 6p 1载体表达的融合蛋白保留了天然蛋白的抗原性。
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| 关 键 词： | 禽 多杀性巴氏杆菌 成熟外膜蛋白H基因 聚丙烯酰胺凝胶电泳 免疫印迹法 融合蛋白 |
| 文章编号： | 1000-6419(2005)01-0045-04 |
| 修稿时间： | 2004年10月25 |
Study on prokaryotic expression of mature outer membrane protein H gene of C48-1 |
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| CAO Su-fang,HUANG Qing-yun,HAN Xian-gan,DENG Xian-fang.Study on prokaryotic expression of mature outer membrane protein H gene of C48-1[J].Veterinary Science in China,2005,35(1):45-48. |
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| Authors: | CAO Su-fang HUANG Qing-yun HAN Xian-gan DENG Xian-fang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | avian Pasteurella multocida omp_(m)H SDS-PAGE Western-blotting fusion protein |
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