| 小反刍兽疫病毒RT-PCR检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 毛立,窦永喜,翟军军,王玉朝,巩伟,才学鹏.小反刍兽疫病毒RT-PCR检测方法的建立[J].中国兽医科学,2010,40(6). |
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| 作者姓名： | 毛立 窦永喜 翟军军 王玉朝 巩伟 才学鹏 |
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| 作者单位： | 毛立,王玉朝,巩伟(中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室,甘肃兰州,730046;新疆农业大学动物医学学院,新疆乌鲁木齐830052);窦永喜,翟军军,才学鹏(中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室,甘肃兰州,730046) |
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| 基金项目： | 国家农业公益性行业科研专项，现代农业产业技术体系建设专项 |
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| 摘 要： | 通过分析小反刍兽疫病毒(PPRV)不同毒株的N基因序列,根据N基因保守区序列设计了1对引物,根据肌动蛋白基因序列设计了另1对引物作为内参,建立了小反刍兽疫RT-PCR诊断方法,预期扩增片段分别为687bp和493bp。以PPRVNigeria75/1株RNA和山羊组织总RNA混合物为模板,在RT-PCR反应体系内同时加入绵羊肌动蛋白基因引物和PPRVN基因引物,结果可扩增出2条目的条带,序列测定结果证实,分别扩增出了目的基因。对RT-PCR反应条件进行了优化,在最佳反应条件下,该RT-PCR最低可检测到12TCID50/mL的病毒RNA。用该方法对人工感染PPRVNigeria75/1株山羊的血液样品进行检测,结果可扩增出目的基因片段。表明建立的RT-PCR方法具有较好的特异性、敏感性和准确性。
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| 关 键 词： | 小反刍兽疫病毒 反转录聚合酶链反应 检测 |
Development of RT-PCR for detection of peste des petits ruminants virus |
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