| 鸭坦布苏病毒E蛋白膜外区的原核表达与鉴定 |
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| 引用本文： | 刘宗梁,付钰广,吉艳红,李郁,魏建忠,朱启运.鸭坦布苏病毒E蛋白膜外区的原核表达与鉴定[J].中国兽医科学,2013(8):850-854. |
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| 作者姓名： | 刘宗梁 付钰广 吉艳红 李郁 魏建忠 朱启运 |
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| 作者单位： | 安徽农业大学动物科技学院;中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室 |
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| 基金项目： | 甘肃省高层次人才科技创新创业扶持行动项目(1013JHTA008);中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(0032011027) |
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| 摘 要： | 为获得鸭坦布苏病毒(duck Tembusu virus,DTMUV)E蛋白膜外区的表达产物,以DTMUV安徽分离株(AH10)E基因序列设计特异性引物,扩增E基因,将其克隆至原核表达载体pET-SUMO中,构建重组表达质粒pET-SUMO-E,然后将其转化至感受态细胞E.coli Rosetta(DE3)中,并以IPTG诱导表达。经SDS-PAGE检测,获得了70ku的表达产物,与预期结果相符。Western-blot分析表明,目的蛋白能与兔抗DTMUV E蛋白多克隆血清及DTMUV鸭阳性血清发生特异性反应,显示出良好的反应活性。结果表明,成功表达了E蛋白膜外区,这一成果为DTMUV疫苗制备和诊断试剂盒的研发奠定了基础。
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| 关 键 词： | 鸭坦布苏病毒 E蛋白膜外区 原核表达 鉴定 |
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