丹皮酚抑制脂多糖诱导的血管内皮细胞TNF-α 释放对共培养体系中血管平滑肌细胞凋亡及 p38 MAPK信号通路的影响

目的 观察丹皮酚（Paeonol，Pae）对脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）损伤的大鼠血管内皮细胞（vascular endothelial cells，VECs）炎性因子释放及对血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells，VSMCs）凋亡的影响，阐明Pae抑制VSMCs凋亡是否通过影响VECs释放的炎性因子调控p38 MAPK信号通路。方法 组织块预消化贴壁法原代培养VECs和VSMCs；Transwell小室建立VSMCs和VECs共培养体系；LPS诱导VECs损伤；MTT方法检测细胞存活率；ELISA检测VECs分泌肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-alpha, TNF-α）的水平；流式细胞仪检测VSMCs凋亡率；Western blotting检测VSMCs中p38 MAPK信号通路及凋亡相关蛋白表达。结果 与正常对照组比较，LPS可显著提高VECs分泌的TNF-α水平（P＜0.05），明显升高共培养体系中VSMCs p38 MAPK信号通路蛋白及凋亡相关蛋白（p-MKK3/6、p-p38、p53和Cleaved caspase-3）水平（P<0.05），显著提高VSMCs凋亡率（P<0.05）；与LPS刺激组比较，Pae可显著抑制VECs分泌的TNF-α（P＜0.05），明显降低共培养体系中VSMCs p38 MAPK信号通路蛋白及凋亡相关蛋白（p-MKK3/6、p-p38、p53和Cleaved caspase-3）水平（P＜0.05），显著降低VSMCs凋亡率（P＜0.05）。结论 Pae可抑制VECs释放TNF-α，从而抑制p38 MAPK信号通路，进而减少VSMCs凋亡。