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牛病毒性腹泻病毒RT-PCR检测方法的建立及应用
引用本文:孟雨,吴发兴,朱紫祥,张志,张燕霞,刘爽,李晓成,王晶钰.牛病毒性腹泻病毒RT-PCR检测方法的建立及应用[J].中国兽医科学,2010,40(1).
作者姓名:孟雨  吴发兴  朱紫祥  张志  张燕霞  刘爽  李晓成  王晶钰
作者单位:孟雨(西北农林科技大学,陕西,杨凌,712100;中国动物卫生与流行病学中心,山东,青岛,266032);吴发兴,张志,张燕霞,刘爽,李晓成(中国动物卫生与流行病学中心,山东,青岛,266032);朱紫祥,王晶钰(西北农林科技大学,陕西,杨凌,712100) 
基金项目:国家"十一五"科技支撑计划项目,陕西省"13115"科技创新工程重大科技专项,广西科技攻关项目 
摘    要:根据GenBank中登录的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)5′UTR基因序列,设计合成了1对特异性引物,建立了检测BVDV218bp片段的RT-PCR方法。通过对该方法的特异性、敏感性和重复性进行试验,结果显示,该方法从BVDV标准毒株OregonC24V中扩增出了218bp的特异性片段,而对猪瘟病毒、蓝舌病病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病病毒、MDBK正常细胞的扩增结果均为阴性。经对标准毒株的细胞毒进行检测,其敏感度达10-1TCID50。不同人员用该方法进行检测,结果均一致,表明其重复性好。应用该方法对70份临床疑似发病猪样品进行检测,结果检出11份阳性,阳性检出率约为15.7%。在对5份细胞培养用犊牛血清的检测中,亦检出2份阳性。表明,建立的RT-PCR方法具有特异、灵敏、高效、快速的特点,可用于BVDV的临床检测及流行病学监测。

关 键 词:牛病毒性腹泻病毒  5'UTR基因  反转录聚合酶链反应  检测

Establishment and application of RT-PCR for detection of bovine viral diarrhea virus
MENG Yu,WU Fa-xing,ZHU Zi-xiang,ZHANG Zhi,ZHANG Yan-xia,LIU Shuang,LI Xiao-cheng,WANG Jing-yu.Establishment and application of RT-PCR for detection of bovine viral diarrhea virus[J].Veterinary Science in China,2010,40(1).
Authors:MENG Yu    WU Fa-xing  ZHU Zi-xiang  ZHANG Zhi  ZHANG Yan-xia  LIU Shuang  LI Xiao-cheng  WANG Jing-yu
Institution:MENG Yu1,2,WU Fa-xing2,ZHU Zi-xiang1,ZHANG Zhi2,ZHANG Yan-xia2,LIU Shuang2,LI Xiao-cheng2,WANG Jing-yu1 (1.Northwest Sci-Tech University of Agriculture , Forestry,Yangling 712100,China,2.China Animal Health , Epidemiology Center,Qingdao 266032,China)
Abstract:
Keywords:bovine viral diarrhea virus  5'UTR gene  RT-PCR  detection
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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