非洲猪瘟病毒P54蛋白的真核表达及间接ELISA检测方法的建立 |
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引用本文: | 梁云浩,曹琛福,陶 虹,吕建强,唐 勇.非洲猪瘟病毒P54蛋白的真核表达及间接ELISA检测方法的建立[J].中国兽医科学,2014(4):373-378. |
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作者姓名: | 梁云浩 曹琛福 陶 虹 吕建强 唐 勇 |
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作者单位: | 暨南大学广东省分子免疫与抗体工程重点实验室;深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心; |
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基金项目: | 国家高技术研究发展计划(863)项目(2012AA101301) |
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摘 要: | 利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达出非洲猪瘟病毒P54蛋白。经SDS-PAGE和Westernblot分析后,以P54重组蛋白作为检测抗原包被酶标板,通过优化各反应条件,建立了检测非洲猪瘟血清抗体的间接ELISA方法。结果显示,P54重组蛋白的大小约为25ku;经Western-blot试验证实,它具有良好的抗原性。建立的间接ELISA方法的检测灵敏度可达1∶320,批内、批间变异系数均小于10%。与商品化的非洲猪瘟竞争ELISA试剂盒比较,符合率达100%。用该间接ELISA方法检测其他不同疫病猪的阳性血清样本,结果均为阴性,表明无交叉反应。结果表明,建立的用以检测非洲猪瘟病毒的间接ELISA方法具有敏感性高、重复性好、特异性好的特点。
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关 键 词: | 非洲猪瘟病毒 P蛋白 重组杆状病毒 间接ELISA |
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