| 非洲猪瘟病毒环介导等温扩增诊断方法的建立 |
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| 引用本文： | 王华,王君玮,徐天刚,张维,任炜杰,王志亮.非洲猪瘟病毒环介导等温扩增诊断方法的建立[J].中国兽医科学,2010,40(9). |
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| 作者姓名： | 王华 王君玮 徐天刚 张维 任炜杰 王志亮 |
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| 作者单位： | 中国动物卫生与流行病学中心,国家外来动物疫病诊断中心,ABSL-3实验室,山东,青岛,266114 |
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| 基金项目： | 公益性行业(农业)科研专项 |
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| 摘 要： | 通过对GenBank中登录的非洲猪瘟病毒(ASFV)p72蛋白基因序列进行分析,根据p72保守区序列设计合成了内(FIP,BIP)、外(F3,B3)2对引物,其中外引物扩增片段的大小为184bp。通过对反应条件进行优化,建立了非洲猪瘟LAMP检测方法。结果显示,该方法在62℃保温60min即可完成,最低可检测到1×101 copies/μL的病毒DNA,与常规PCR方法相比灵敏度高100倍。对ASFV、猪圆环病毒2型、猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒基因组DNA同时检测,结果仅有ASFV出现条带,而其他均未出现目的条带。表明,建立的ASFV-LAMP诊断方法具有较好的特异性和敏感性。
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| 关 键 词： | 非洲猪瘟病毒 环介导等温扩增反应 诊断 |
Development of a loop-mediated isothermal amplification system for the rapid diagnosis of African swine fever virus |
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