| 重组猪IgGⅡB类Fc受体蛋白的原核表达和抗体的制备 |
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| 引用本文： | 刘玉松,夏平安,赵琳,范旭,张凤华,徐红运,刘肖萍,张志远,崔保安.重组猪IgGⅡB类Fc受体蛋白的原核表达和抗体的制备[J].中国兽医科学,2010,40(1). |
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| 作者姓名： | 刘玉松 夏平安 赵琳 范旭 张凤华 徐红运 刘肖萍 张志远 崔保安 |
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| 作者单位： | 河南农业大学牧医工程学院,河南,郑州,450002 |
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| 摘 要： | 根据GenBank中猪IgGⅡB类Fc受体剪接异构体cDNA(swFcγRⅡB)基因序列(FJ608551),利用Primer5.0软件设计合成了1对特异性引物,扩增swFcγRⅡB去掉胞内区和跨膜区的基因,PCR产物经KpnⅠ+EcoRⅠ双酶切后,将截短的swFcγRⅡB基因亚克隆到原核表达载体pET-32a中构建了重组表达质粒pET-swFcγRⅡB,在IPTG诱导下成功表达了分子质量约为40ku的融合蛋白swFcγRⅡB-His,该表达蛋白在细胞质中主要以不溶性包涵体的形式存在。原核表达蛋白经纯化免疫小鼠,制备鼠源swFcγRⅡB封闭抗体,ELISA检测抗体效价为1:5120,具有高度特异性。Western-blotting检测表明,制备的多克隆抗体可以与融合蛋白swFcγRⅡB-His特异性结合。
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| 关 键 词： | 猪 IgGⅡB类Fc受体 原核表达 抗体制备 FcγRⅡ B |
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