| 猪CD8分子α链胞外区基因片段在毕赤酵母中的表达 |
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| 引用本文： | 崔青,王生富,房永祥,陈国华,孙晓林,景志忠.猪CD8分子α链胞外区基因片段在毕赤酵母中的表达[J].中国兽医科学,2010,40(5). |
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| 作者姓名： | 崔青 王生富 房永祥 陈国华 孙晓林 景志忠 |
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| 作者单位： | 崔青,孙晓林,景志忠,CUI Qing,SUN Xiao-lin,JING Zhi-zhong(中国农业科学院,兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,农业部兽医公共卫生重点实验室,甘肃省动物寄生虫病重点实验室,甘肃,兰州,730046;甘肃农业大学,动物医学院,甘肃,兰州,730070);王生富,房永祥,陈国华,WANG Sheng-fu,FANG Yong-xiang,CHEN Guo-hua(中国农业科学院,兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,农业部兽医公共卫生重点实验室,甘肃省动物寄生虫病重点实验室,甘肃,兰州,730046) |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金，甘肃省农业生物技术专项，甘肃省科技支撑计划项目 |
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| 摘 要： | 为了给猪CD8α分子单克隆抗体的研制提供高生物学活性的抗原,采用PCR方法从pGEM-T-pCD8α重组质粒中克隆了pCD8α分子的胞外区基因片段,构建了真核融合表达载体pPIC9K-pCD8α-ED,在毕赤酵母中进行表达,并对重组基因工程菌的发酵时间、pH值进行了优化。结果表明,表达出约20ku的目的蛋白,诱导表达的最适pH值为5.0,诱导表达的最佳时间是120h。Western-blot分析结果显示,表达产物能被鼠抗人CD8α多克隆抗体识别,在20ku左右出现目的条带,说明表达的目的蛋白具有免疫活性结构。
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| 关 键 词： | 猪CD8α分子 胞外区基因片段 真核表达 毕赤酵母 |
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