猪巨细胞病毒gB优势抗原表位区的原核表达及其多克隆抗体的制备 |
| |
引用本文: | 江一帆,刘骁,廖珊,朱玲,周远成.猪巨细胞病毒gB优势抗原表位区的原核表达及其多克隆抗体的制备[J].中国兽医科学,2013(9):936-940. |
| |
作者姓名: | 江一帆 刘骁 廖珊 朱玲 周远成 |
| |
作者单位: | 四川农业大学动物生物技术中心;四川农业大学动物疫病与人类健康四川省重点实验室 |
| |
基金项目: | 四川省青年基金项目(200930421);教育部新世纪优秀人才支撑计划项目(1NCET 11-1059);四川省科技支撑计划项目(2010NZ0112,2012NZ0001) |
| |
摘 要: | 为制备猪巨细胞病毒(PCMV)gB优势抗原表位区重组蛋白的多克隆抗体,进一步分析PCMV gB蛋白的生物学特性,建立PCMV抗体血清学检测方法。对PCMV gB基因优势抗原表位区进行了PCR扩增,将回收的目的片段连接入pET32a(+)表达载体,转化入E.coli Rosetta(DE3),构建了重组表达菌E.coli Rosetta-pET32a(+)-gB,经IPTG诱导表达了gB优势抗原表位区重组蛋白。对重组蛋白进行纯化后,通过Western-blot试验验证了重组蛋白的反应原性,并免疫家兔制备了多克隆抗体。结果表明,该重组蛋白大量可溶性表达,且具有良好的反应原性。琼脂扩散试验及Western-blot检测表明,多克隆抗体效价达到1∶8,且能与gB优势抗原表位区重组蛋白特异性结合。证实,成功制备了PCMV gB优势抗原表位区重组蛋白多克隆抗体。
|
关 键 词: | 猪巨细胞病毒 gB优势抗原表位区 多克隆抗体 |
本文献已被 CNKI 等数据库收录! |
|