| H3N2亚型猪流感病毒实时荧光定量PCR快速检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 陈艳,张春明,乔传玲,杨焕良,张飞,吴运谱,辛晓光,陈化兰.H3N2亚型猪流感病毒实时荧光定量PCR快速检测方法的建立[J].中国兽医科学,2009,39(10). |
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| 作者姓名： | 陈艳 张春明 乔传玲 杨焕良 张飞 吴运谱 辛晓光 陈化兰 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,农业部动物流感重点开放实验室,黑龙江,哈尔滨,150001 |
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| 基金项目： | 国家科技攻关计划项目 |
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| 摘 要： | 根据H3N2亚型猪流感病毒(SIV)血凝素(hemagglutinin,HA)和神经氨酸酶(neuraminidase,NA)基因保守序列,分别设计并合成了特异性引物和TaqMan MGB探针,利用实时荧光定量PCR技术检测SIV.使用含有选定检测序列的重组质粒pMD18-H3HA、pMD18-N2NA标准品绘制标准曲线,其相关系数分别为0.990 15(H3HA)和0.999 47(N2NA).检测结果显示,该方法的敏感性可达100 copies/μL,除H3N2亚型SIV外,对H1亚型、H9亚型SIV以及猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒、猪瘟病毒、猪生殖与呼吸综合征病毒和猪2型圆环病毒的检测均为阴性,应用该方法对实验室感染样品进行检测,其结果与病毒分离结果的符合率为95.83%.表明,该方法特异性强、重复性好,有望成为H3N2亚型SIV的一种特异、敏感、快速的定量检测方法.
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| 关 键 词： | 猪流感病毒 H3N2亚型 TaqMan MGB探针 实时荧光定量PCR |
Development of a real-time fluorescent quantitative PCR assay for rapid detection of swine influenza virus H3 N2 subtype |
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