| 猪δ冠状病毒TaqMan-MGB荧光定量RT-PCR方法的建立和应用 |
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| 引用本文： | 李晓菲,陈婷,韩薇,孙爱荣,葛晓杰,梁文花,黄艳,王力,王彩宏,魏笑笑,秦立廷.猪δ冠状病毒TaqMan-MGB荧光定量RT-PCR方法的建立和应用[J].中国兽医科学,2019(4):425-431. |
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| 作者姓名： | 李晓菲 陈婷 韩薇 孙爱荣 葛晓杰 梁文花 黄艳 王力 王彩宏 魏笑笑 秦立廷 |
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| 作者单位： | 山东新希望六和集团有限公司;青岛市黄岛区动物疫病预防与控制中心 |
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| 基金项目： | 国家重点研发计划项目(2017YFD0500600;2016YFD0501506) |
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| 摘 要： | 为了快速准确地检测猪δ冠状病毒(porcine deltacoronavirus,PDCoV),本研究根据PDCoV基因序列保守区设计特异性引物和TaqMan-MGB探针,建立了一种特异性检测PDCoV的TaqMan-MGB荧光定量方法。结果显示,该方法特异性良好,对猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪轮状病毒、猪伪狂犬病病毒、猪细小病毒和猪圆环病毒2型等的检测结果均为阴性,无交叉反应;模板浓度在3.15×108～3.15×101copies/?L范围内具有良好的线性关系;敏感性高,最低检测限为10 copies/?L的模板;重复性好,批内和批间重复性试验变异系数分别为0.25%～1.06%和0.58%～1.27%;对临床样品的检测结果显示,本研究建立的荧光定量检测方法对PDCoV的阳性检出率(40%)高于常规PCR方法对PDCoV的阳性检出率(31.7%)。该方法的建立为PDCoV的实验室鉴别诊断及流行病学调查提供了快速、准确的检测手段。
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| 关 键 词： | 猪δ冠状病毒 TAQMAN-MGB探针 荧光定量方法 |
Establishment and application of TaqMan-MGB real-time RT-PCR for the detection of porcine deltacoronavirus |
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| LI Xiao-fei,CHEN Ting,HAN Wei,SUN Ai-rong,GE Xiao-jie,LIANG Wen-hua,HUANG Yan,WANG Li,WANG Cai-hong,WEI Xiao-xiao,QIN Li-ting.Establishment and application of TaqMan-MGB real-time RT-PCR for the detection of porcine deltacoronavirus[J].Veterinary Science in China,2019(4):425-431. |
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| Authors: | LI Xiao-fei CHEN Ting HAN Wei SUN Ai-rong GE Xiao-jie LIANG Wen-hua HUANG Yan WANG Li WANG Cai-hong WEI Xiao-xiao QIN Li-ting |
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| Institution: | (Shandong New Hope Liuhe Group Co.,Ltd.,Qingdao 266000,China;Huangdao Animal Disease Prevention and Control Center,Qingdao 266400,China) |
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| Abstract: | LI Xiao-fei;CHEN Ting;HAN Wei;SUN Ai-rong;GE Xiao-jie;LIANG Wen-hua;HUANG Yan;WANG Li;WANG Cai-hong;WEI Xiao-xiao;QIN Li-ting(Shandong New Hope Liuhe Group Co.,Ltd.,Qingdao 266000,China;Huangdao Animal Disease Prevention and Control Center,Qingdao 266400,China) |
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| Keywords: | porcine deltacoronavirus TaqMan-MGB probe real-time fluorescent quantitative PCR |
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