猪流行性腹泻病毒变异毒株与经典毒株RT-PCR鉴别检测方法的建立及应用 |
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引用本文: | 秦毅斌,卢冰霞,赵武,何颖,李莹莹,李斌,梁家幸,梁保忠,苏乾莲,蒋冬福,周英宁.猪流行性腹泻病毒变异毒株与经典毒株RT-PCR鉴别检测方法的建立及应用[J].中国兽医科学,2014(5):509-514. |
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作者姓名: | 秦毅斌 卢冰霞 赵武 何颖 李莹莹 李斌 梁家幸 梁保忠 苏乾莲 蒋冬福 周英宁 |
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作者单位: | 广西兽医研究所广西畜禽疫苗新技术重点实验室;广西大学动物科学技术学院 |
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基金项目: | 广西水产畜牧兽医局科研项目(桂渔牧科12049031);广西畜禽疫苗新技术重点实验室系统性研究课题(12-071-28-A-5);广西基本科研业务费专项(桂科专项13-1) |
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摘 要: | 为建立猪流行性腹泻病毒(PEDV)变异毒株的快速RT-PCR检测方法,根据GenBank中PEDV S基因序列设计合成1对特异性扩增引物,通过优化反应条件,建立了检测PEDV变异毒株的RT-PCR方法。结果显示,建立的RT-PCR鉴别检测方法能特异性区分疫苗株CV777和PEDV变异毒株,仅能扩增出PEDV变异毒株826bp的目的片段,与猪传染性胃肠炎病毒、A群猪轮状病毒、猪嵴病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、伪狂犬病病毒、猪瘟病毒及猪细小病毒均无交叉反应。敏感性试验结果显示,该方法能检测到的最低核酸质量为11.3pg。利用该方法对采集自广西部分地区的123份临床腹泻样品进行检测,临床腹泻样品中PEDV阳性率为67.5%,变异毒株占总PEDV毒株的86.7%(72/83)。结果表明,该RT-PCR鉴别诊断方法特异性强、灵敏度高、操作简单,为猪流行性腹泻的流行病学及病原诊断研究提供了可供借鉴的技术手段。
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关 键 词: | 猪流行性腹泻病毒 RT-PCR 鉴别诊断 |
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