应用RNA干扰技术抑制捻转血矛线虫Hc38基因转录的研究 |
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引用本文: | 陈南颖,何延华,王新华,薄新文,韩猛立,张兴亚.应用RNA干扰技术抑制捻转血矛线虫Hc38基因转录的研究[J].中国兽医科学,2012(3):227-232. |
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作者姓名: | 陈南颖 何延华 王新华 薄新文 韩猛立 张兴亚 |
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作者单位: | 新疆农垦科学院新疆兵团绵羊繁育生物技术重点实验室;石河子大学动物科技学院 |
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基金项目: | 国家自然科学基金资助项目(30960281) |
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摘 要: | 为研究RNA干扰对捻转血矛线虫Hc38基因转录的抑制作用,针对Hc38基因序列设计并合成特异性dsRNA、3对siRNAs(siRNA1,siRNA2,siRNA3),采用浸泡方式分别将dsRNA、siRNAs导入捻转血矛线虫感染性L3期幼虫体内,利用实时荧光定量PCR分析Hc38基因在L3期幼虫中的相对含量以确定抑制效果。通过体外转录成功获得高浓度和高纯度的dsRNA,L3期幼虫经浸泡处理3d后,siRNAs组Hc38基因的相对含量分别为(14.93±1.75)%、(26.34±2.91)%和(15.86±2.54)%,dsRNA组为(32.27±1.50)%,均显著低于对照组。表明通过浸泡法导入的dsRNA和siRNAs均能有效抑制Hc38基因的转录,从而为捻转血矛线虫及其他寄生线虫的基因功能研究提供了一种新的方法。
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关 键 词: | 捻转血矛线虫 Hc38基因 RNA干扰 浸泡 |
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