鸡滑液囊支原体卵黄抗体的制备与鉴定

为了制备高效价特异性的鸡滑液囊支原体卵黄抗体,为鸡滑液囊支原体病防治的研究探索新的方法和途径,用鸡滑液囊支原体灭活疫苗免疫健康产蛋母鸡,获取含有大量卵黄抗体的卵黄,利用水稀释法和盐析法对卵黄进行粗提,再利用超滤及透析方法进行提纯。ELISA检测免疫后不同时期血清抗体和提纯后卵黄抗体的效价,结果显示,卵黄抗体的变化趋势与血清抗体基本一致,但卵黄抗体的产生滞后于血清抗体,SDS-PAGE分析结果显示,在约25 ku和65 ku处出现清晰的两条带,Western-blot结果显示,纯化后的卵黄抗体能与牛支原体抗原悬液发生特异性结合,具有良好的免疫反应性,提纯后的卵黄抗体浓度达7.2 mg/mL,最高效价达到了1∶10~4以上。结果表明,本试验制备的鸡滑液囊支原体卵黄抗体具有较强的特异性,从而为鸡滑液囊支原体的制备和卵黄抗体在鸡滑液囊支原体病上的应用奠定了一定基础。