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环形泰勒虫TaSDP基因的原核表达及TaSDP蛋白多克隆抗体的制备
引用本文:杨聪山,刘军龙,李有全,田占成,赵洪喜,刘娟,刘爱红,任巧云,牛庆丽,杨吉飞,谢俊仁,罗金,陈泽,张林,刘志杰,刘光远,殷宏,关贵全,罗建勋.环形泰勒虫TaSDP基因的原核表达及TaSDP蛋白多克隆抗体的制备[J].中国兽医科学,2015(3):221-226.
作者姓名:杨聪山  刘军龙  李有全  田占成  赵洪喜  刘娟  刘爱红  任巧云  牛庆丽  杨吉飞  谢俊仁  罗金  陈泽  张林  刘志杰  刘光远  殷宏  关贵全  罗建勋
作者单位:中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室甘肃省动物寄生虫病重点实验室;江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心
基金项目:国家自然科学基金资助项目(31372432,31402189);农业科技创新工程(ASTIP);PiroVAC(KBBE-3-245145);国家引进国际先进农业科学技术计划(948)项目(2010-S06);国家肉牛牦牛产业技术体系专项(NBCIS CARS-38)
摘    要:利用PCR技术从环形泰勒虫裂殖体cDNA中扩增TaSDP(Theileria annulata schizont-derived protein)基因,用获得的基因片段构建原核表达载体pET-30a(+)-TaSDP,并在大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中进行表达,蛋白以包涵体的形式存在;融合蛋白经纯化后免疫家兔,制备多克隆抗体,并分别用ELISA和Western-blot测定抗体的效价及特异性。结果显示,获得的TaSDP基因的长度为552bp,制备的多克隆抗体不仅可与重组蛋白His-TaSDP发生反应,而且可以识别天然的虫体蛋白,效价高于1∶215。上述研究结果为开展TaSDP在细胞调控方面的研究奠定了基础。

关 键 词:环形泰勒虫  裂殖体  TaSDP  表达  多克隆抗体
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