| 二参真武汤调控PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制心肌纤维化的体外实验研究 |
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| 作者姓名： | 赵 研 甘芮溪 张小月 程晓昱 葛 岚 彭代银 王红松 陈卫东 |
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| 作者单位： | 1.安徽中医药大学药学院，安徽 合肥 230012; 2.安徽中医药大学第一附属医院，安徽 合肥 230031；3.安徽道地中药材品质提升协同创新中心，安徽 合肥 230012；4.中药饮片制造新技术与研发安徽省重点实验室，安徽 合肥 230012；5.中药复方安徽省重点实验室，安徽 合肥 230012 |
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| 基金项目： | 省部共建安徽道地中药材品质提升协同创新中心（教科信厅函〔2022〕4号） |
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| 摘 要： | 目的 探究二参真武汤抑制心肌细胞纤维化的作用机制。方法 采用灌胃给予SPF大鼠二参真武汤、贝那普利7 d的方法制备含药血清，从出生3 d内的乳鼠心脏中提取原代心肌成纤维细胞，采用免疫荧光和台盼蓝染色法鉴定细胞纯度与成活率，采用CCK-8法确定二参真武汤含药血清的最佳给药浓度与给药时间，采用血管紧张素Ⅱ（angiotensin Ⅱ，Ang Ⅱ）刺激原代心肌成纤维细胞复制心肌纤维化模型，将原代心肌成纤维细胞分为正常组、模型组、二参真武汤组、贝那普利组，采用ELISA法检测胶原蛋白（collagenase,Col）-Ⅰ和Col-Ⅲ含量，采用Western blot法检测平滑肌肌动蛋白（alpha-smooth muscle actin，α-SMA）、Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR蛋白表达水平，qRT-PCR法检测α-SMA、Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、PI3K、AKT、mTOR mRNA表达水平。结果 提取的原代心肌成纤维细胞纯度与成活率均达到95%以上。与正常组比较，模型组、Col-Ⅰ、Col-Ⅲ含量显著升高（P＜0.05），α-SMA、Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白及mRNA表达水平显著升高（P＜0.05）；与模型组比较，二参真武汤组原代心肌成纤维细胞中α-SMA、Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白及mRNA表达水平均显著降低（P＜0.05）。结论 二参真武汤抑制心肌纤维化的机制与调节PI3K/AKT/mTOR信号通路有关。
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| 关 键 词： | 心肌纤维化 原代心肌成纤维细胞 二参真武汤 PI3K AKT mTOR 信号通路 |
Mechanism of Action of Ershen Zhenwu Decoction in Inhibiting Myocardial Fibrosis by Regulating the PI3K/AKT/mTOR Signaling Pathway: An in vitro Study |
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| Institution: | 1. School of Pharmacy, Anhui University of Chinese Medicine, Anhui Hefei 230012, China; 2. The First Affiliated Hospital of Anhui University of Chinese Medicine, Anhui Hefei 230031, China; 3. Synergetic Innovation Center of Anhui Authentic Chinese Medicine Quality Improvement, Anhui Hefei 230012, China; 4. Anhui Province Key Laboratory of Traditional Chinese Medicine Decoction Pieces of New Manufacturing Technology, Anhui Hefei 230012, China; 5. Key Laboratory of Chinese Medicinal Formula of Anhui Province, Anhui Hefei 230012, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Myocardial fibrosis Primary myocardial fibroblast Ershen Zhenwu Decoction PI3K AKT mTOR Signaling pathway |
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