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兔阴茎海绵体平滑肌细胞培养及其RyRs的表达
作者姓名:Liu HG  Zhu GY  Zhao ZQ  Liu ZP
作者单位:1. 复旦大学上海医学院法医学系,上海,200032;司法部司法鉴定科学技术研究所,上海,200063;淄博市中级人民法院,山东,淄博,255037
2. 司法部司法鉴定科学技术研究所,上海,200063
3. 复旦大学上海医学院法医学系,上海,200032
摘    要:目的探讨兰尼碱受体(RyRs)在兔阴茎海绵体平滑肌细胞(CCSM)的正常表达。方法取雄性性成熟新西兰兔CCSM细胞,用组织块法进行细胞培养,差速贴壁法进行细胞纯化,利用倒置显微镜观察、免疫荧光染色法鉴定细胞纯度;取三代以内培养细胞,通过Genebank查出RyRscDNA序列,针对RyRs3种不同亚型的非同源部分用PrimerPremier5.0软件设计3对引物,以逆转录PCR方法分别检测RyRs3种亚型mRNA的表达,凝胶成像系统分析结果。结果培养7d开始有细胞从组织块长出,15~20d后长满瓶底,呈典型的“峰-谷”现象,经倒置显微镜观察见培养的细胞呈现典型的梭形,免疫荧光染色可见细胞内染为绿色的肌丝,证实培养的细胞为CCSM细胞,经差速贴壁法纯化后,细胞纯度可接近100%。经RT-PCR检测,CCSM只表达RyRs1,未见RyRs其余亚型的表达,提示CCSM表达RyRs1蛋白。结论CCSM表达RyRs中的1亚型,提示其可能参与CCSM细胞的钙调节,进而能调节阴茎勃起功能。

关 键 词:兰尼碱受体  阴茎海绵体平滑肌  细胞培养  游离钙
文章编号:1004-5619(2006)01-0024-04
修稿时间:2005年10月17

Primary study in rabbit penile corpus cavernosum smooth muscle cell culture and RyRs expression
Liu HG,Zhu GY,Zhao ZQ,Liu ZP.Primary study in rabbit penile corpus cavernosum smooth muscle cell culture and RyRs expression[J].Journal of Forensic Medicine,2006,22(1):24-27,F0004.
Authors:Liu Hong-guo  Zhu Guang-you  Zhao Zi-qin  Liu Zhi-ping
Institution:Department of Forensic Medicine, Shanghai Medical College, Fudan University, Shanghai 200032, China. Hg-liu@sohu.com
Abstract:
Keywords:ryanodine receptors  penile corpus cavernosum smooth muscle  cell culture  [Ca2 ]i
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