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牛D型产气荚膜梭菌肠毒血症dot-ELISA诊断方法的建立
引用本文:李云霄,金鑫,单雪梅,张营,任春宇.牛D型产气荚膜梭菌肠毒血症dot-ELISA诊断方法的建立[J].中国兽医科学,2009,39(3).
作者姓名:李云霄  金鑫  单雪梅  张营  任春宇
作者单位:延边大学,农学院,吉林,龙井,133400
基金项目:吉林延边朝鲜族自治州科技攻关重点项目 
摘    要:以纯化的菌体蛋白为诊断抗原,建立了牛D型产气荚膜梭菌特异性抗体的斑点酶联免疫吸附试验(dot-ELISA)检测方法,确定了各组分的最适反应条件:抗原包被浓度为1.95 μg/mL,血清稀释度为1:320,二抗稀释度为1:2000,封闭液为30 mL/L脱脂乳,抗原、血清、二抗和封闭液的作用温度及时间均为37℃30 min.用该dot-ELISA检测30份牛血清,纯化抗原比粗提抗原的阳性检出率高16.7%;dot-ELISA的灵敏度是琼脂免疫扩散试验(AGID)法的43倍;用dot-ELISA法对100份牛血清样本进行检测,阳性率为59.0%;经特异性试验、重复性试验和与AGID法比较,表明用纯化抗原建立的方法具有良好的特异性、敏感性和重复性.

关 键 词:  D型产气荚膜梭菌  纯化抗原  斑点酶联免疫吸附试验

Development of a dot-enzyme linked immunosorbent assay for detection of bovine antibody against Clostridium perfringens type D
LI Yun-xiao,JIN Xin,SHAN Xue-mei,ZHANG Ying,REN Chun-yu.Development of a dot-enzyme linked immunosorbent assay for detection of bovine antibody against Clostridium perfringens type D[J].Veterinary Science in China,2009,39(3).
Authors:LI Yun-xiao  JIN Xin  SHAN Xue-mei  ZHANG Ying  REN Chun-yu
Abstract:
Keywords:
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