| 大熊猫GM-CSF基因的克隆与分析及GM-CSF生物学活性的检测 |
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| 引用本文： | 李凤琴,徐志文,朱玲,古锋,王承东,李德生,郭万柱.大熊猫GM-CSF基因的克隆与分析及GM-CSF生物学活性的检测[J].中国兽医科学,2012(10):1063-1067. |
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| 作者姓名： | 李凤琴 徐志文 朱玲 古锋 王承东 李德生 郭万柱 |
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| 作者单位： | 四川农业大学动物医学院动物生物技术中心;中国保护大熊猫研究中心雅安碧峰峡基地 |
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| 基金项目： | 卧龙大熊猫俱乐部基金项目(201001);四川省青年科技基金项目(2012JQ0037) |
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| 摘 要： | 用含刀豆蛋白的营养液培养大熊猫外周血中分离的淋巴细胞,72h后抽提RNA。设计1对引物,通过RT-PCR方法对大熊猫GM-CSF基因片段进行扩增。测序后对其进行分析,并将该序列克隆到pCI-neo真核载体中,命名为pCI-G,然后免疫健康小鼠,同时设立pCI-neo载体和PBS免疫组为对照。序列分析结果显示,该基因片段含一个完整的开放性阅读框,编码144个氨基酸,与其他几个物种同源性为76.1%～86.2%,预测蛋白中含较多的α-螺旋区域,主要集中在3个区域。免疫结果显示,与对照组相比,pCI-G能够引起小鼠体内IL-4和IFN-γ持续快速的增长,在首免后第56天,二者的质量浓度可达到70.86pg/mL±4.22pg/mL和237.39pg/mL±3.17pg/mL。该质粒可增强小鼠Th2型和Th1型免疫应答,是极具应用潜力的细胞因子。
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| 关 键 词： | 大熊猫 GM-CSF基因 生物学活性 白细胞介素4 γ-干扰素 |
Cloning and analysis of GM-CSF gene from giant panda and detection of biological activities of GM-CSF |
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| LI Feng-qin,XU Zhi-wen,ZHU Ling,GU Feng,WANG Cheng-dong,LI De-sheng,GUO Wan-zhu.Cloning and analysis of GM-CSF gene from giant panda and detection of biological activities of GM-CSF[J].Veterinary Science in China,2012(10):1063-1067. |
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| Authors: | LI Feng-qin XU Zhi-wen ZHU Ling GU Feng WANG Cheng-dong LI De-sheng GUO Wan-zhu |
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| Institution: | 1(1.Animal Biotechnology Center,College of Veterinary Medicine,Sichuan Agricultural University,Ya’an 625014,China;2.Ya’an Bifengxia Base,China Giant Panda Protection and Research Center,Ya’an 625014,China) |
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| Abstract: | |
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