| 猪瘟病毒复合多表位抗原基因的克隆表达及其免疫学特性 |
| |
| 引用本文： | 侯相民,田宏,吴锦艳,陈妍,尚佑军,刘湘涛.猪瘟病毒复合多表位抗原基因的克隆表达及其免疫学特性[J].中国兽医科学,2011(11). |
| |
| 作者姓名： | 侯相民 田宏 吴锦艳 陈妍 尚佑军 刘湘涛 |
| |
| 作者单位： | 中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室;兰州交通大学化学与生物工程学院; |
| |
| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863)项目(2006AA10A204) |
| |
| 摘 要： | 为研究猪瘟病毒多表位疫苗,参照GenBank及文献中已发表的猪瘟病毒抗原表位,结合计算机分析软件进行优化和组合。将重组的多表位基因BT23人工合成克隆至pMD18-T质粒中,利用BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切并回收BT23基因,将BT23基因片段亚克隆插入pGEX-6P-1表达载体中,构建了猪瘟病毒复合多表位抗原基因的原核表达质粒pGEX-BT23,经酶切和测序鉴定正确后转化感受态细胞BL21(DE3),并进行了IPTG诱导表达。经SDS-PAGE分析,以终浓度为0.9mmol/L的IPTG进行诱导,8h后表达量最高,表达产物为融合蛋白,并且以包涵体形式存在,分子质量约36ku,表达产量约占菌体总蛋白的30%。Western-blot检测结果表明,表达的融合蛋白能与猪瘟病毒阳性血清发生特异性反应,说明表达产物具有良好的反应原性。免疫攻毒试验结果表明,复合多表位融合蛋白具有免疫保护作用,这为应用该融合蛋白制备猪瘟病毒免疫血清学诊断试剂和多表位疫苗的研究奠定了基础。
|
| 关 键 词： | 猪瘟病毒 复合多表位抗原基因 融合表达 活性分析 |
Cloning,expression and immunological characteristics of compound multi-epitope gene of classical swine fever virus |
| |
| HOU Xiang-min,TIAN Hong,WU Jin-yan,CHEN Yan,SHANG You-jun,LIU Xiang-tao.Cloning,expression and immunological characteristics of compound multi-epitope gene of classical swine fever virus[J].Veterinary Science in China,2011(11). |
| |
| Authors: | HOU Xiang-min TIAN Hong WU Jin-yan CHEN Yan SHANG You-jun LIU Xiang-tao |
| |
| Institution: | HOU Xiang-min1,2,TIAN Hong1,WU Jin-yan1,CHEN Yan1,SHANG You-jun1,LIU Xiang-tao1 (1.State Key Laboratory of Veterinary Etiological Biology/Key Laboratory of Animal Virology of Ministry of Agriculture/Lanzhou Veterinary Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Lanzhou 730046,China,2.School of Chemical and Biological Engineering,Lanzhou Jiaotong University,Lanzhou 730070,China) |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | classical swine fever virus compound multi-epitope gene fusion expression activity analysis |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
|
