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猪圆环病毒2型Cap蛋白单克隆抗体的制备与鉴定
引用本文:曹彦琼,王先炜,李文良,姜平.猪圆环病毒2型Cap蛋白单克隆抗体的制备与鉴定[J].中国兽医科学,2011(9).
作者姓名:曹彦琼  王先炜  李文良  姜平
作者单位:南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室;
基金项目:农业部行业专项(200903036-4,200803020-5); 江苏省教育厅产业发展项目(JH09-1); 教育部博士点基金项目(20090097120025); 江苏省自然科学基金项目(BK2010450)
摘    要:利用重组杆状病毒表达的猪圆环病毒2型(PCV2)Cap蛋白免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术,共获得6株能稳定分泌抗Cap蛋白抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为3H9/1H5、3H9/3C7、4A9/3E2、4A9/3D7、6G7/7B6和6G7/8D3,并通过ELISA、Western-blotting和间接免疫荧光试验(IFA)对6株单抗的特性和抗原表位进行分析鉴定。结果显示,6株杂交瘤细胞培养上清的抗体效价为1∶1 024~1∶2 048,腹水效价为1∶163 840~1∶204 800。3H9/1H5、3H9/3C7、6G7/7B6和6G7/8D3的亚型为IgG1型,4A9/3E2和4A9/3D7为IgG2b型,所有单抗的轻链均为κ型。Western-blotting和IFA结果表明6株单抗均能与重组Cap蛋白和PCV2产生特异性反应。相加ELISA结果显示,6株单抗可能识别不同的抗原表位。为准确鉴别不同单抗针对的抗原位点,以截短表达的重组Cap蛋白为抗原,进行Western-blot鉴定。结果显示,4A9/3E2与4A9/3D7的抗原表位位于101~150aa,其余4株单抗可能针对1~50aa或者天然...

关 键 词:猪圆环病毒2型  Cap蛋白  单克隆抗体  抗原表位  

Preparation and identification of monoclonal antibodies against Cap protein of porcine circovirus type 2
CAO Yan-qiong,WANG Xian-wei,LI Wen-liang,JIANG Ping.Preparation and identification of monoclonal antibodies against Cap protein of porcine circovirus type 2[J].Veterinary Science in China,2011(9).
Authors:CAO Yan-qiong  WANG Xian-wei  LI Wen-liang  JIANG Ping
Institution:CAO Yan-qiong,WANG Xian-wei,LI Wen-liang,JIANG Ping(Key Laboratory of Animal Diseases Diagnostic and Immunology of the Ministry of Agriculture/ Nanjing Agricultural University,Nanjing 210095,China)
Abstract:
Keywords:porcine circovirus type 2  Cap protein  McAb  epitope  
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