牛脊柱畸形综合征HRM-非标记探针检测方法的建立与应用 |
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引用本文: | 苏锐,郭鹏,何江,韩泽洲,王曦.牛脊柱畸形综合征HRM-非标记探针检测方法的建立与应用[J].中国兽医科学,2018(10). |
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作者姓名: | 苏锐 郭鹏 何江 韩泽洲 王曦 |
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作者单位: | 中北大学化学工程与技术学院;山西大学生物技术研究所;山西省畜牧遗传育种中心;山西省农业科学研究院畜牧兽医兽医研究所 |
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摘 要: | 为建立用于牛脊柱畸形综合征(CVM)检测的高分辨率熔解曲线(HRM)非标记探针法,根据Gen Bank中SLC35A3基因序列设计PCR引物及非标记性探针,构建G/G型、G/T型、T/T型3种标准质粒,利用质粒作为标准品建立HRM特征图谱。采用优化的HRM-非标记探针法对305份荷斯坦奶牛血样及冷冻精液样品中SLC35A3位点的基因型进行检测,同时采用测序法进行验证。结果,305份样本中9份冻精样本为CVM携带者,携带率为2.95%,检测结果与测序法检测结果一致,准确率达100%。上述研究结果表明,本研究建立的针对牛CVM中SLC35A3基因G-T位点突变检测的HRM-非标记探针方法是一种简单快速、灵敏特异、高效准确的牛CVM有害基因分型检测技术。
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