三个猪戊型肝炎病毒ORF2基因连续片段核酸疫苗的构建 |
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引用本文: | 李斌,苏乾莲,赵武,秦毅斌,梁家幸,肖爱欢,卢冰霞,李莹莹,何颖,段群棚,姜佳佳,梁保忠.三个猪戊型肝炎病毒ORF2基因连续片段核酸疫苗的构建[J].中国兽医科学,2013(10):1059-1066. |
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作者姓名: | 李斌 苏乾莲 赵武 秦毅斌 梁家幸 肖爱欢 卢冰霞 李莹莹 何颖 段群棚 姜佳佳 梁保忠 |
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作者单位: | 广西兽医研究所;广西畜禽疫苗新技术重点实验室;广西大学动物科学技术学院 |
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基金项目: | 广西基本科研业务费专项(桂科专项10-1;桂科专项11-1);广西科技攻关项目(桂科攻10100014-4);广西水产畜牧兽医局科技计划项目(桂渔牧科1204931);广西畜禽疫苗新技术重点实验室系统性研究课题(12-071-28-A-5) |
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摘 要: | 为了研制猪戊型肝炎(HE)基因工程疫苗,设计引物扩增猪戊型肝炎病毒(HEV)的基因片段LB1、LB2、LB3,分别与真核表达载体pEASY-M1Expression Vector直接进行T-A连接,构建得到了重组真核表达质粒pEASY-LB1、pEASY-LB2、pEASY-LB3。将这3个重组真核表达质粒分别转染293T细胞,采用实时荧光定量RT-PCR检测目的基因,并进行SDS-PAGE电泳分析和Western-blot鉴定。结果显示,重组真核表达质粒pEASY-LB1、pEASY-LB2、pEASY-LB3在转染的293T细胞中均可表达一约20.5ku的目的蛋白,且具有良好的HEV抗原性。本试验获得的3个HEV ORF2连续片段的候选核酸疫苗为今后进一步研制HEV核酸疫苗奠定了基础。
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关 键 词: | 猪 戊型肝炎病毒 ORF2 真核表达质粒 核酸疫苗 |
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