溶血性曼氏杆菌和多杀性巴氏杆菌双重PCR检测方法的建立及应用 |
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引用本文: | 冯旭飞,刀筱芳,李定菲,汤 承,王远微,杨发龙.溶血性曼氏杆菌和多杀性巴氏杆菌双重PCR检测方法的建立及应用[J].中国兽医科学,2014(6):624-629. |
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作者姓名: | 冯旭飞 刀筱芳 李定菲 汤 承 王远微 杨发龙 |
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作者单位: | 西南民族大学生命科学与技术学院;四川农业大学动物医学院; |
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基金项目: | 国家星火计划重大项目(2012GA810001-6) |
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摘 要: | 本研究旨在建立溶血性曼氏杆菌与多杀性巴氏杆菌的双重PCR检测方法,从而为临床上同时检测这两种病原的感染提供一种更加方便、快捷、准确的工具。根据溶血性曼氏杆菌lkt基因和多杀性巴氏杆菌sp6基因分别设计引物,优化条件后进行特异性和敏感性的评价,并对180份临床样本进行了检测。结果显示,溶血性曼氏杆菌和多杀性巴氏杆菌引物的最佳终浓度分别为10和20pmol/L。该方法的特异性较好,对其他无关病原不检出。对溶血性曼氏杆菌和多杀性巴氏杆菌的检测限分别为56和22pg,与独立PCR相同。该方法对临床样本的检测结果表明,溶血性曼氏杆菌和多杀性巴氏杆菌的检出率分别为51.67%和47.78%。研究结果表明,本研究建立的双重PCR诊断技术具有特异性好、敏感度高等特点,为临床上溶血性曼氏杆菌和多杀性巴氏杆菌的快速检测、鉴定以及混合感染的流行病学调查提供了有用的工具。
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关 键 词: | 溶血性曼氏杆菌 多杀性巴氏杆菌 双重PCR |
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