| 大熊猫白细胞介素-18的原核表达及免疫功能分析 |
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| 引用本文： | 王强,严悦,邓家波,牛李丽,余建秋,尹萌萌,张义正,谭雪梅.大熊猫白细胞介素-18的原核表达及免疫功能分析[J].中国兽医科学,2014(10). |
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| 作者姓名： | 王强 严悦 邓家波 牛李丽 余建秋 尹萌萌 张义正 谭雪梅 |
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| 作者单位： | 成都动物园;四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室四川省分子生物学及生物技术重点实验室; |
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| 基金项目： | 成都大熊猫繁育研究基金项目(CPF-2010-02) |
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| 摘 要： | 以本实验室构建的含有GpIL-18编码区序列的质粒pMD-GpIL-18为模板,PCR扩增GpIL-18ORF后连接到pET-28a原核表达载体,转化大肠杆菌Rosetta(DE3)进行诱导表达,纯化目的蛋白(PGpIL-18)。利用荧光定量PCR检测PGpIL-18蛋白对C57BL/6J小鼠脾细胞中细胞因子的影响。将PGpIL-18蛋白与细菌疫苗同时注射小鼠,检测其免疫增强效应。Western-blot结果表明,IPTG诱导PGpIL-18融合表达;其产物PGpIL-18能刺激小鼠脾细胞大量分泌IFN-γ,增加GM-CSF和TNF-α的表达量。同时注射PGpIL-18蛋白和细菌疫苗的小鼠血清中IgG的质量浓度明显高于对照组。同时,通过金黄色葡萄球菌和大肠杆菌攻毒试验,发现PGpIL-18蛋白可以提高疫苗对小鼠的保护率。PGpIL-18能促进特异性免疫应答的发生,这一结果为重组PGpIL-18蛋白作为佐剂的开发利用奠定了理论基础。
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| 关 键 词： | 大熊猫 白细胞介素- 原核表达 免疫功能 小鼠 |
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