| 猪圆环病毒2型ORF2基因的优化表达及活性检测 |
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| 引用本文： | 路明华,王宏俊,路迎迎,张培君,龚玉梅,王雪敏.猪圆环病毒2型ORF2基因的优化表达及活性检测[J].中国兽医科学,2014(7). |
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| 作者姓名： | 路明华 王宏俊 路迎迎 张培君 龚玉梅 王雪敏 |
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| 作者单位： | 北京市农林科学院畜牧兽医研究所畜禽疫病防控技术北京市重点实验室;河北工程大学农学院;河北省禽病工程技术研究中心; |
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| 基金项目： | 北京市农林科学院创新能力建设项目(KJCX20140410);国家自然科学基金资助项目(31272558,31001072);国家高技术研究发展计划(863)项目(2011AA10A210);河北省教育厅自然科学重点项目(ZH200811) |
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| 摘 要： | 通过软件分析后,截去猪圆环病毒2型ORF2基因中影响蛋白表达的保守基因,并对其余的基因进行了密码子优化。把改造后的ORF2基因连接到pGEX-4T-1载体上并转入表达宿主菌大肠杆菌BL21(DE3)进行IPTG诱导表达。结果显示,重组菌可以表达出分子质量为50ku的重组蛋白,在0.2mmol/L的IPTG诱导5h情况下表达效果最好,表达的蛋白以包涵体形式存在于菌体中。表达产物经琼脂糖凝胶纯化可得到较纯的蛋白。经Western-blot分析,所纯化的蛋白能刺激小鼠产生相应抗体,并能与PCV2阳性血清进行特异性免疫印迹反应。试验结果证实表达的蛋白具有良好的抗原性。
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| 关 键 词： | 猪圆环病毒型 ORF 原核表达 抗原性 |
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