山羊鼻内肿瘤病毒RT-PCR检测方法的建立 |
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引用本文: | 郝中香,谢智勇,廖红,刘丹,郭玲,刘杰,杨绍林,舒蕾,颜其贵.山羊鼻内肿瘤病毒RT-PCR检测方法的建立[J].中国兽医科学,2014(9). |
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作者姓名: | 郝中香 谢智勇 廖红 刘丹 郭玲 刘杰 杨绍林 舒蕾 颜其贵 |
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作者单位: | 四川农业大学动物医学院;重庆太极药用动植物资源开发有限公司;四川农业大学动物疫病与人类健康四川省重点实验室; |
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基金项目: | 教育部“长江学者和创新团队发展计划”创新团队项目(IRT0848);科技部科技人员服务企业行动计划项目(2009GJF00049) |
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摘 要: | 根据GenBank中登录的山羊鼻内肿瘤病毒(ENTV)SC株的基因序列,设计合成了1对特异性引物,通过对反应条件进行优化,建立了一种快速检测ENTV的RT-PCR方法。结果显示,以该引物进行RTPCR扩增,能得到与理论设计值大小相符的323bp的特异性条带;与ENTV-SC株相应序列的同源性达98%;该方法最低可检测出6pg的ENTV;用此方法对健康山羊鼻黏膜上皮、健康牛鼻黏膜上皮、绵羊肺腺瘤病毒、肺炎球菌和大肠杆菌的扩增结果均为阴性,重复性和稳定性好;对随机收集的100份山羊样品进行检测,并与临床诊断结果进行比较,符合率为100%。结果表明,此方法特异性强,敏感性高,稳定性和重复性均好,可用于山羊鼻内肿瘤病毒的临床检测和试验研究。
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关 键 词: | 山羊 鼻内肿瘤病毒 RT-PCR 检测 |
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