H5、H7和H9亚型禽流感病毒液相芯片检测方法的建立 |
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引用本文: | 张晓娜,王慧煜,梅琳,韩雪清,林祥梅,张书霞.H5、H7和H9亚型禽流感病毒液相芯片检测方法的建立[J].中国兽医科学,2013(5):494-499. |
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作者姓名: | 张晓娜 王慧煜 梅琳 韩雪清 林祥梅 张书霞 |
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作者单位: | 中国检验检疫科学研究院;南京农业大学动物医学院 |
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基金项目: | 国家重点基础研究发展计划(973)项目(2011CB504704) |
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摘 要: | 为应用液相芯片技术建立同时检测H5、H7、H9亚型禽流感病毒(AIV)的方法,在GenBank中收集H5、H7、H9亚型AIV的HA基因序列,利用DNAMAN软件分析比较筛选出特异的保守片段,设计引物和探针。将多重不对称RT-PCR扩增产物与偶联荧光微球的探针进行杂交,建立多重液相芯片方法。结果显示,多重液相芯片技术对H5、H7、H9亚型AIV核酸的最低检出量分别为18.5、28.7、20.7pg/μL,检测的特异性和重复性都很好,应用该方法和禽流感检测试剂盒双盲试验同时对50份已知病毒的样品进行了检测,两者符合率为100%。该方法为禽流感病毒核酸液相芯片的进一步研究奠定了基础。
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关 键 词: | 液相芯片 核酸杂交 禽流感病毒 快速检测 |
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