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Ⅰ型鸭肝炎病毒逆转录套式PCR检测方法的建立
引用本文:黄显明,张小飞,李春芬,廖俊伟,毛火云.Ⅰ型鸭肝炎病毒逆转录套式PCR检测方法的建立[J].中国兽医科学,2008,38(1):25-28.
作者姓名:黄显明  张小飞  李春芬  廖俊伟  毛火云
作者单位:1. 安徽农业大学,动物科技学院,安徽,合肥,230036;南京天邦生物科技有限公司,江苏,南京,211102
2. 江苏省农业科学院,兽医研究所,江苏,南京,210014;南京天邦生物科技有限公司,江苏,南京,211102
摘    要:根据GenBank中登录的Ⅰ型鸭肝炎病毒(DHV-Ⅰ)A66株的RNA聚合酶基因序列,设计合成了2对引物,建立了适合DHV-Ⅰ快速检测的逆转录套式PCR方法(RT-nested-PCR),采用该方法对DHV-ⅠA66弱毒株和R85952强毒株进行了检测.结果显示,均能扩增到304 bp的条带,而正常鸭胚、健康鸭肝组织、鸭瘟病毒、鹅细小病毒、禽流感病毒(H9亚型)、新城疫病毒、传染性腔上囊病病毒、减蛋综合征病毒、鸭源大肠杆菌、鸭疫里氏杆菌和鸭源多杀性巴氏杆菌的扩增结果均为阴性.该方法第1次扩增的敏感性是100 Pg,第2次扩增的敏感性是1 fg,第2次比第1次扩增的敏感性高106倍.表明,所建立的逆转录套式PCR方法可用于鸭病毒性肝炎(DVH)的临床诊断、病料检测和分子流行病学调查等.

关 键 词:Ⅰ型鸭肝炎病毒  逆转录套式PCR  检测  毒性肝炎  病毒  逆转录套式  检测方法  type  hepatitis  virus  duck  detection  assay  nested  调查  分子流行病学  临床诊断  鸭病  敏感性  阴性  多杀性巴氏杆菌  鸭源大肠杆菌  鸭疫里氏杆菌  减蛋综合征
文章编号:1673-4696(2008)01-0025-04
修稿时间:2007年9月21日

Establishment of a nested RT-PCR assay for detection of duck hepatitis virus type Ⅰ
HUANG Xian-ming,ZHANG Xiao-fei,LI Chun-fen,LIAO Jun-wei,MAO Huo-yun.Establishment of a nested RT-PCR assay for detection of duck hepatitis virus type Ⅰ[J].Veterinary Science in China,2008,38(1):25-28.
Authors:HUANG Xian-ming  ZHANG Xiao-fei  LI Chun-fen  LIAO Jun-wei  MAO Huo-yun
Abstract:
Keywords:
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