| 鸡γ-干扰素实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 王群,刘光亮,童铁钢,肖一红,吴东来.鸡γ-干扰素实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立[J].中国兽医科学,2007,37(7):631-635. |
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| 作者姓名： | 王群 刘光亮 童铁钢 肖一红 吴东来 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,黑龙江,哈尔滨,150001;中国农业科学院研究生院,北京,100081 |
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| 摘 要： | 为建立一种检测鸡γ-干扰素的实时荧光定量RT-PCR方法,采用RT-PCR方法从ConA诱导活化的鸡脾淋巴细胞的总RNA中扩增得到鸡γ-干扰素(ChIFN-γ)和鸡的28 SrRNA(Ch28 S)基因,将其分别克隆至体外转录载体后经体外转录获得了ChIFN-γ和Ch28 S的RNA,采用各自的特异性引物及Taqman探针,以Ch28 S RNA作为内参进行一步法实时荧光定量RT-PCR,检测ChIFN-γ。结果表明:ChIFN-γ和内参Ch28 S的Ct值与标准品稀释梯度在1×102~1×107拷贝/μL范围分别呈良好的线性关系,r2均大于0.99。此方法用于检测ChIFN-γ,具有简便、高效、敏感、特异的特点。
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| 关 键 词： | 鸡-γ干扰素 实时荧光定量RT-PCR 检测方法 |
| 文章编号： | 1673-4696(2007)07-0631-05 |
| 修稿时间： | 2007年2月25日 |
Establishment of a real-time fluorescent quantitative RT-PCR assay for the detection of chicken IFN-γ,gene |
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| WANG Qun,LIU Guang-liang,TONG Tie-gang,XIAO Yi-hong,WU Dong-lai.Establishment of a real-time fluorescent quantitative RT-PCR assay for the detection of chicken IFN-γ,gene[J].Veterinary Science in China,2007,37(7):631-635. |
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| Authors: | WANG Qun LIU Guang-liang TONG Tie-gang XIAO Yi-hong WU Dong-lai |
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