| 猪胸膜肺炎放线杆菌PCR检测方法的建立及临床应用 |
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| 引用本文： | 冼琼珍,叶润全,顾万军,王淑敏,黄良宗.猪胸膜肺炎放线杆菌PCR检测方法的建立及临床应用[J].中国兽医科学,2007,37(2):117-120. |
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| 作者姓名： | 冼琼珍 叶润全 顾万军 王淑敏 黄良宗 |
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| 作者单位： | 佛山科学技术学院,生命科学学院,广东,佛山,528231 |
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| 基金项目： | 广东省自然科学基金;广东省佛山市科技发展专项基金 |
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| 摘 要： | 为建立直接检测可疑病料中胸膜肺炎放线杆菌(APP)的PCR诊断方法,对用以扩增apxⅣA毒力基因3′端长约442 bp的核苷酸片段的引物、模板、TaqDNA聚合酶、dNTPs的最适剂量及退火温度进行了优化筛选,并进行了特异性及重复性试验;以筛选出的优化条件,对临床可疑病料进行了PCR检测。结果,在25μL体系中,以5 pmol/μL引物、0.25μLTaqDNA聚合酶、2 mmol/L dNTPs、56℃退火温度对APP标准菌株apxⅣA毒力基因的扩增效果最好,重复性和稳定性高;而对类症菌株的扩增结果则为阴性,表明其特异性强。对分离到APP的病料PCR阳性率为100%(5/5);未分离到APP的纤维渗出性病料中,新鲜与陈旧病料PCR阳性率分别为70.59%(12/17)、50.00%(4/8),而非纤维渗出性病料的PCR结果均为阴性(0/45、0/9)。结果表明,建立的PCR方法特异、快速、稳定、敏感,优于细菌学方法,它可作为APP可疑病料的理想诊断方法。
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| 关 键 词： | 猪 胸膜肺炎放线杆菌 临床应用 |
| 文章编号： | 1673-4696(2007)02-0117-04 |
| 修稿时间： | 2006年10月13 |
Development and clinical application of a PCR assay for detection of porcine Actinobacillus pleuropneumoniae |
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| XIAN Qiong-zhen,YE Run-quan,GU Wan-jun,WANG Shu-min,HUANG Liang-zong.Development and clinical application of a PCR assay for detection of porcine Actinobacillus pleuropneumoniae[J].Veterinary Science in China,2007,37(2):117-120. |
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| Authors: | XIAN Qiong-zhen YE Run-quan GU Wan-jun WANG Shu-min HUANG Liang-zong |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | PCR |
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