| 猪细小病毒SC-1株VP2基因的定点突变及其对该基因表达的影响 |
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| 引用本文： | 胡秋炅,徐志文,郭万柱,朱玲,蒋清蓉,王印,王小玉.猪细小病毒SC-1株VP2基因的定点突变及其对该基因表达的影响[J].中国兽医科学,2008,38(7). |
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| 作者姓名： | 胡秋炅 徐志文 郭万柱 朱玲 蒋清蓉 王印 王小玉 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金
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四川省科技厅资助项目 |
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| 摘 要： | 根据GenBank中的猪细小病毒(PPV)VP2基因序列设计并合成了2对突变引物,对PPV SC-1株VP2基因进行了定点突变.利用重叠延伸PCR技术分别将VP2蛋白中第402位(A)和214位(B)的半胱氨酸突变为精氨酸,并定向克隆入真核表达载体pPI-2.EGFP中,构建含报告基因EGFP的重组质粒pPI-2.EGFP.VP2(A)、pPI-2.EGFP.VP2(B);利用脂质体介导法将上述重组质粒转染COS-7细胞,从而研究该突变对VP2基因表达的影响.结果显示,成功构建了合突变体及EGFP的真核表达载体;在倒置荧光显微镜下,突变后的质粒转染呈现不同的荧光信号,A样品的荧光呈颗粒状分布于细胞中,而B样品与阳性对照相似,荧光信号均匀分布于细胞中.提示,突变的引入是导致表达差异的主要原因.
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| 关 键 词： | 猪细小病毒 VP2基因 定点突变 真核表达 病毒 基因表达 定点突变 影响 gene expression effect strain porcine 表达差异 均匀分布 相似 阳性对照 于细胞 颗粒状 样品 荧光信号 显微镜下 倒置 突变体 |
Site-directed mutations of VP2 gene of porcine parvovirus strain SC-1 and its effect on expression of the gene |
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| HU Qiu-jiong,XU Zhi-wen,GUO Wan-zhu,ZHU Ling,JIANG Qing-rong,WANG Yin,WANG Xiao-yu.Site-directed mutations of VP2 gene of porcine parvovirus strain SC-1 and its effect on expression of the gene[J].Veterinary Science in China,2008,38(7). |
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| Authors: | HU Qiu-jiong XU Zhi-wen GUO Wan-zhu ZHU Ling JIANG Qing-rong WANG Yin WANG Xiao-yu |
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