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微小隐孢子虫和安氏隐孢子虫SYBR Green real time PCR检测方法的建立
引用本文:李安平,黄克和,王权,朱志宏,曹积生,巩新民,杨国柱.微小隐孢子虫和安氏隐孢子虫SYBR Green real time PCR检测方法的建立[J].中国兽医科学,2009,39(6).
作者姓名:李安平  黄克和  王权  朱志宏  曹积生  巩新民  杨国柱
作者单位:1. 南京农业大学动物医学院,江苏,南京,210095;中国农业科学院上海兽医研究所,上海,200232;山东益生种畜禽股份有限公司,山东,烟台,265508
2. 南京农业大学动物医学院,江苏,南京,210095
3. 中国农业科学院上海兽医研究所,上海,200232
4. 上海光明荷斯坦牧业有限公司,上海,200072
5. 山东益生种畜禽股份有限公司,山东,烟台,265508
基金项目:上海市科技兴农重点攻关项目 
摘    要:根据GenBank中登录的隐孢子虫小亚基rRNA基因序列设计1对引物,并以标准基因组DNA为模板,初步建立了检测乳牛微小隐孢子虫和安氏隐孢子虫的SYBR Green real time PCR方法,并对乳牛微小隐孢子虫和安氏隐孢子虫阳性样品和上海40份乳牛粪便进行了检测.结果表明,此次建立的real timePCR对微小隐孢子虫和安氏隐孢子虫均能扩增出曲线,且其他寄生虫(鸡贝氏隐孢子虫、刚地弓形虫、犬新孢子虫)和大肠杆菌均未检测到;标准基因组DNA的检测阈值达到5个拷贝,牛粪中卵囊的最低检测量为每克粪便5个卵囊,乳牛粪便阳性率为15%(6/40).表明,建立的荧光定量PCR快速、特异、敏感,可用于乳牛隐孢子虫病的流行病学调查.

关 键 词:实时荧光定量聚合酶链式反应  微小隐孢子虫  安氏隐孢子虫

Establishment of a SYBR Green real time PCR assay for detection of Cryptosporidium parvum and Cryptosporidium andersoni
LI An-ping,HUANG Ke-he,WANG Quan,ZHU Zhi-hong,CAO Ji-sheng,GONG Xin-min,YANG Guo-zhu.Establishment of a SYBR Green real time PCR assay for detection of Cryptosporidium parvum and Cryptosporidium andersoni[J].Veterinary Science in China,2009,39(6).
Authors:LI An-ping  HUANG Ke-he  WANG Quan  ZHU Zhi-hong  CAO Ji-sheng  GONG Xin-min  YANG Guo-zhu
Abstract:
Keywords:SYBR Green
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