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| 新城疫病毒F48E9株V基因的表达及其抗血清的制备 | |
| 引用本文： | 韩放,闫丽辉,曹殿军,刘培欣,李景鹏.新城疫病毒F48E9株V基因的表达及其抗血清的制备[J].中国兽医科学,2006,36(5):357-361. |
| 作者姓名： | 韩放 闫丽辉 曹殿军 刘培欣 李景鹏 |
| 作者单位： | 1. 中国农业科学院,哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001;东北农业大学,黑龙江,哈尔滨,150030 2. 中国农业科学院,哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001 3. 东北农业大学,黑龙江,哈尔滨,150030 |
| 摘 要： | 采用PCR方法从鸡源新城疫病毒(NDV)强毒F48E9株P基因重组质粒中扩增出了V 基因全长cDNA,并引进相应的突变位点,将其克隆到pMD18-T载体,然后亚克隆到原核表达载体 pET-30c上,重组质粒经酶切、PCR鉴定及测序,筛选出阳性重组质粒,并命名为pET-30c-V。将 pET-30c-V转化大肠埃希氏菌BL21(DE3),用1 mmol／L IPTG 37℃过夜诱导表达,SDS-PAGE 及Western-blotting分析结果表明,所表达的NDV V重组蛋白主要以包涵体形式存在,分子质量约28 ku,与理论值大小相符。将包涵体用8 mol／L脲变性,经Ni-NTA柱纯化,透析复性,得到纯化的V蛋白。用复性后的V蛋白免疫21日龄SPF鸡(300 μg／只),成功制备了抗鸡NDV V蛋白的抗血清。 |
| 关 键 词： | 新城疫病毒 V基因 原核表达 |
| 文章编号： | 1673-4696(2006)05-0357-05 |
| 修稿时间： | 2006年1月13日 |
Expression of V gene of Newcastle disease virus F48E9 strain and the preparation of specific antiserum against V protein |
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| HAN Fang,YAN Li-hui,CAO Dian-jun,LIU Pei-xin,LI Jing-peng.Expression of V gene of Newcastle disease virus F48E9 strain and the preparation of specific antiserum against V protein[J].Veterinary Science in China,2006,36(5):357-361. | |
| Authors: | HAN Fang YAN Li-hui CAO Dian-jun LIU Pei-xin LI Jing-peng |
| Abstract: | |
| Keywords: | Newcastle disease virus V gene prokaryotic expression |
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