| 禽呼肠孤病毒σNS非结构蛋白基因的克隆和表达 |
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| 引用本文： | 谢丽基,谢芝勋.禽呼肠孤病毒σNS非结构蛋白基因的克隆和表达[J].中国兽医科学,2005,35(12):964-968. |
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| 作者姓名： | 谢丽基 谢芝勋 |
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| 作者单位： | 1. 广西大学,动物科技学院,广西,南宁,530005
2. 广西兽医研究所,广西,南宁,530001 |
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| 基金项目： | 广西留学回国人员基金项目(桂科回0144014和0342006)，广西科技攻关项目(0235001-4) |
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| 摘 要： | 采用RT-PCR技术扩增了禽呼肠孤病毒(ARV)S1133株与广西分离株R2σNS非结构蛋白基因,将σNS基因克隆到质粒表达载体pGEX-4T-1上,获得的重组质粒经PCR、酶切鉴定以及测序分析,σNS基因的插入位置、大小和阅读框均正确,将阳性克隆命名为pGEX-S1133-σNS和pGEX-R2-σNS。构建好的重组质粒经37℃1 mmol/L IPTG诱导、SDS-PAGE分析超声裂解后的上清和沉淀,显示目的蛋白以包涵体方式表达,其蛋白质分子质量约为66.2 ku,约占菌体总量的31.5%~34.8%。Western-blotting分析表明,目的蛋白能够与ARV阳性血清发生特异性反应,表明该重组蛋白具有较好的抗原性。
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| 关 键 词： | 禽呼肠孤病毒 σNS基因 克隆表达 pGEX-4X-1 |
| 文章编号： | 1000-6419(2005)12-0964-05 |
| 修稿时间： | 2005年8月8日 |
Cloning and expression of nonstructural protein gene σNS of avian reovirus |
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| XIE Li-ji,XIE Zhi-xun.Cloning and expression of nonstructural protein gene σNS of avian reovirus[J].Veterinary Science in China,2005,35(12):964-968. |
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| Authors: | XIE Li-ji XIE Zhi-xun |
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