猪白细胞介素21基因的原核表达与多抗血清的制备 |
| |
引用本文: | 周雪晨,刘星,朱雪蛟,范宝超,白娟,姜平.猪白细胞介素21基因的原核表达与多抗血清的制备[J].中国兽医科学,2015(4):352-355. |
| |
作者姓名: | 周雪晨 刘星 朱雪蛟 范宝超 白娟 姜平 |
| |
作者单位: | 南京农业大学动物医学院农业部动物细菌学重点实验室 |
| |
基金项目: | 教育部科技项目(313031,20120097110043);国家自然科学基金项目(31230071);国家生猪产业技术体系专项(CARS-36) |
| |
摘 要: | 为了制备猪白细胞介素21(porcine interleukin-21,pIL-21)的多克隆抗体,采用RT-PCR从猪外周血单个核细胞(PBMC)扩增获得pIL-21基因,然后将其克隆至大肠杆菌表达载体pET-32a(+)之中,转化至大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达。SDS-PAGE和Western-blot分析结果显示,pIL-21以可溶性蛋白形式表达,分子质量为35ku,具有良好的反应原性。经过Ni-NTA镍离子亲和层析纯化,获得纯化的重组蛋白pIL-21。用其免疫BALB/c小鼠制备抗pIL-21血清抗体。Western-blot分析结果显示,该抗体可与杆状病毒表达的重组Cap-pIL-21、ConA和PHA共刺激的猪PBMC细胞发生特异性反应,ELISA抗体效价可达1∶12 800。上述研究结果为pIL-21的生物学功能研究奠定了重要基础。
|
关 键 词: | 猪 白细胞介素21 原核表达 多克隆抗体 |
本文献已被 CNKI 等数据库收录! |
|